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第一章 引言
第一节 血脑屏障及其相关研究进展
1.1.1 血脑屏障的结构功能
1.1.2 病理状态下血脑屏障通透性改变的机制
第二节 原子力显微镜(AFM)工作原理及改进
1.2.1 AFM的原理
1.2.2 AFM的工作模式
1.2.3 AFM的改进
第三节 原子力显微术在生物学研究中的应用
1.3.1 AFM高分辨三维成像功能在细胞形态学检测中的应用
1.3.2 AFM力学检测功能在细胞力学研究中的应用
1.3.3 AFM显微术在生物分子识别中的应用
1.3.4 AFM在细胞生物学应用的局限性及改进方法
第四节 课题的提出和实验方法
1.4.1 目的和意义
1.4.2 研究内容
第二章 具有紧密联合结构特点的大鼠脑微血管内皮细胞(rCMECs)体外培养模型的建立
第一节 实验材料
2.1.1 实验动物和细胞
2.1.2 实验试剂和耗材
2.1.3 主要实验仪器：
第二节 实验方法
2.2.1 rCMECs细胞原代培养及鉴定
2.2.2 ECV304细胞的培养
2.2.3 细胞微丝蛋白荧光染色
2.2.4 细胞形态和力学性质的AFM检测
第三节 实验结果
2.3.1 紧密联合rCMECs的形成
2.3.2 内皮细胞的鉴定结果
2.3.3 不同功能细胞形态学和机械性质的检测分析
第四节 结果讨论
2.4.1 大鼠脑皮层灰质质微血管段过滤法建立紧密联合rCMECs模型
2.4.2 液体环境活细胞AFM成像条件的确立
2.4.3 细胞杨氏模量的计算
2.4.4 细胞机械学性质与细胞功能的关系
第五节 本章小结
第三章 大鼠脑微血管内皮细胞相关病生理过程的原子力显微术研究
第一节 实验材料
3.1.1 细胞
3.1.2 实验试剂和耗材
3.1.3 主要实验仪器
第二节 实验方法
3.2.1 C60(C(COOH)2)2的AFM成像表征
3.2.2 无血清培养条件下rCMECs细胞表面形态的AFM检测
3.2.3 损伤rCMECs细胞表面的AFM和荧光显微镜联合成像
3.2.4 C60(C(COOH)2)2与H2O2损伤rCMECs细胞相互作用的AFM检测
3.2.5 C60(C(COOH)2)2与H2O2损伤rCMECs细胞相互作用的荧光检测
3.2.6 流式细胞术检测
3.2.7 微丝蛋白的荧光染色
第三节 实验结果
3.3.1 损伤rCMECs细胞表面的形态变化
3.3.2 氧化损伤的rCMECs细胞对C60(C(COOH)2)2的摄取
3.3.3 C60(C(COOH)2)2对rCMECs细胞的保护作用
第四节 结果讨论
3.3.1 囊泡结构与血脑屏障通透性的关系
3.3.2 C60(c(COOH)2)2用于脑组织氧化损伤治疗的可行性
第五节 本章小结
第四章 大鼠脑微血管内皮细胞表面细胞黏附因子分布的识别检测
第一节 实验材料
4.1.1 细胞
4.4.2 主要实验试剂：
4.2.3 主要实验仪器：
第二节 实验方法
4.2.1 识别ICAM-1分子的AFM探针制备
4.2.2 ICAM-1保守序列多肽的识别检测
4.2.3 rCMECs细胞表面ICAM-1分子的识别检测
4.2.4 rCMECs细胞表面ICAM-1分子的荧光染色
第三节 实验结果
4.3.1 识别ICAM-1分子的AFM探针的SEM检测
4.3.2 识别ICAM-1分子的AFM探针的功能检测
4.3.3 rCMECs细胞表面ICAM-1分子的分布
第四节 结果讨论
第五节 本章小结
第五章 结论
第一节 研究工作的特色和创新点
第二节 研究工作的独特发现
第三节 研究工作展望
参考文献
致谢
个人简历在学期间发表的学术论文与研究成果
