VDR表达下调介导TNF-a协同TGF-B1诱导EMT的作用并促进乳腺癌转移

摘要

维生素D受体(VDR)是核受体超家族中的一员，它属于配体依赖性的核转录因子，以组织特异性的方式调节特定基因表达，目前发现VDR除了可以和维甲酸受体家族成员形成异二聚体还可以与其他很多因子形成同二聚体或异二聚体发挥功能，预示着VDR的调节作用具有很大的灵活性。
　　 VDR广泛存在于体内的各种组织细胞中，除了传统的维生素D靶器官外在许多肿瘤组织中也发现有VDR表达，目前研究发现VDR调控乳腺细胞癌的增殖、分化与凋亡，但是关于VDR在乳腺癌转移中的作用机制目前尚未阐明。通过免疫组化分析80例乳腺癌病人癌组织中VDR的表达，发现VDR在正常乳腺组织和乳腺癌组织样本中都有表达，VDR表达水平随肿瘤浸润转移程度增强显著降低，提示VDR与乳腺癌的转移相关。同时发现在肿瘤相关巨噬细胞浸润严重的乳腺癌组织中VDR表达水平显著降低，小鼠巨噬细胞raw264.7细胞与4T1细胞共培养的实验结果表明，与4T1细胞共培养促进巨噬细胞极化，刺激raw264.7细胞前炎症因子TNF-α的表达；我们用重组的TNF-α/TGF-β1处理4T1或MCF-7细胞，结果发现TNF-α显著下调4T1细胞和MCF-7细胞VDR的表达，而TGF-β1对VDR表达没有影响；TNF-α增加MCF-7细胞对TGF-β1诱导EMT刺激的敏感性，提示VDR的表达下调可能参与TNF-α与TGF-β1在诱导EMT方面的协同作用。划痕试验结果提示，TNF-α与TGF-β1在增加乳腺癌细胞迁移能力上有协同作用，使用维生素D能有效减少乳腺癌细胞在TNF-α与TGF-β1共同作用后迁移能力的增加。为了进一步了解VDR在乳腺癌细胞转移中的作用，我们在MDA-MB-231中构建了过表达VDR的稳定细胞株，划痕以及Transwell试验的结果提示，过表达VDR的MDA-MB-231细胞较对照组细胞其迁移的能力显著下降。
　　 总之，本研究的结果表明乳腺癌微环境中的前炎症因子能下调乳腺癌细胞VDR的表达，并且增加乳腺癌细胞对诱导EMT刺激的敏感性。VDR表达的下调很有可能介导TNF-α与TGF-β1在诱导EMT方面的协同作用。本研究的结果为阐明乳腺癌转移的机制提供了新的思路，并为维生素D在乳腺癌预防治疗中的作用提供了理论依据。