间充质干细胞治疗肝硬化机理探讨——肝硬化微环境中MSC生物特性的研究

摘要

在我国肝硬化是一种常见病，并成为主要死亡原因，严重危害了我国国民的健康。目前，肝硬化的主要治疗方法是进行肝脏移植治疗，但是健康肝脏的来源缺乏，远远不能满足临床的需求。研究证实通过正确合理的治疗，早期肝硬化(即肝硬化代偿期)是可逆转的，纤维化阶段的肝脏病变是可逆的，肝纤维化可以减轻甚至痊愈。一些临床研究证明了MSCs能有效地提高白蛋白的含量、肝功能和减少肝脏基质中胶原纤维的沉淀，并促进了硬化基质的降解和正常基质的重建。
　　本文旨在探讨MSCs治疗肝硬化机理，采用脐带间充质干细胞，通过MSCs免疫调节作用缓解肝损伤的发展。本文从脐带间充质干细胞培养、诱导分化、动物实验等方面，论证了脐带间充质干细胞治疗肝硬化的机理，以及肝硬化微环境中MSCs生物特性。

目录

声明

摘要

第一章 引言

第一节 我国肝硬化的研究现状

1．1．1 我国肝硬化现状的概述

1．1．2 肝纤维化与肝硬化的关系

1．1．3 目前治疗肝硬化的方法

第二节 MSC治疗肝硬化国内外新进展

2．1．1 间充质干细胞概述

2．1．2 脐带间充质干细胞(hU-MSCs)的形态分析

2．1．3 干细胞治疗肝病的应用情况

2．1．4 间充质干细胞治疗肝硬化的实验研究现状

2．1．5 脐带间充质干细胞的应用前景

第二章 实验研究方法

第一节 人的脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的分离、培养以及鉴定

2．1．1 实验相关溶液的配制

2．1．2 人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的分离

2．1．3 UC-MSCs的传代培养与扩增

2．1．4 流式细胞术检测UC-MSCs表面分子标志

2．1．5 UC-MSCs的体外诱导分化

2．1．6 UC-MSCs的生物学效力检测

第二节 间充质干细胞向肝细胞诱导分化及生物学特性研究

2．2．1 间充质干细胞向肝细胞样细胞诱导分化

2．2．2 间充质干细胞分化为肝细胞样细胞前后的细胞生物学特性变化的研究

第三节 肝纤维化小鼠的造模及治疗

2．3．1 实验小鼠分组造模准备

2．3．2 间充质干细胞体内趋化实验

2．3．3 肝纤维化造模组小鼠的治疗

2．3．4 实验小鼠肝脏免疫组织化学染色

第三章 结果

第一节 UC- MSC细胞形态观察

3．1．1 原代间充质干细胞形态观察

3．1．2 间充质干细胞的扩增传代

3．1．3 UC-MSC细胞表型检测

3．1．4 诱导UC-MSCs向骨、脂肪细胞分化

3．1．5 UC-MSCs的生物学效力检测结果分析

第二节 UC-MSC体外诱导向肝细胞样细胞分化结果

3．2．1 分化鉴定

3．2．2 分化后功能比较研究

第三节 间充质干细胞治疗小鼠肝纤维化实验结果

3．3．1 观察造模及治疗过程中小鼠体重及其他基本生命体征的变化

3．3．2 肝脏切片病理染色

第四章 讨论

附录

参考文献

致谢

个人简历 在学期间发表的学术论文及研究成果