具有活性因子缓释功能人工血管构建及其体内再生研究

摘要

血管组织再生重构是“Cell free”人工血管研究中的关键科学问题。天然血管内皮具有抑制血小板粘附聚集和血栓形成的功能。而平滑肌组织则为血管提供收缩和舒张生理功能，从而维持血管长期通畅并实现血管稳态。
　　本文根据血管组织再生重构的需要，设计构建了由聚己内酯（PCL）微米纤维与胶原纳米纤维构成的微/纳米复合结构人工血管。进一步，以胶原纤维为载体分别装载不同类型的活性分子，以分别实现促内皮和平滑肌再生的目的。利用大鼠腹主动脉模型考察了血管植入后的通畅性和组织再生情况。
　　结果表明：复合结构人工血管中两类纤维形貌规整且均匀分布。PCL微米纤维提供了良好的力学支撑和适宜的孔结构，而胶原纤维通过快速降解逐渐释放活性因子。体内植入2周后，PCL/Col复合人工血管呈现通畅性良好和较高的细胞化水平。DKK3对于血管(干)祖细胞具有一定的趋化作用。人工血管中缓释的 DKK3不仅能够显著促进平滑肌组织的再生，而且再生的平滑肌细胞多呈现收缩功能表型。此外，DKK3还能在一定程度上抑制炎症反应。而人工血管中装载的活性多肽则能有效促进内皮化进程，2周后血管内腔表面基本被内皮覆盖，且内皮细胞沿着血流方向规则排列。而内皮的快速形成也在一定程度上促进了平滑肌的再生。此外，多肽还促进了材料内部的血管新生，这对于抑制血管壁钙化发生、维持血管长期稳态具有重要意义。

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第一章 前言

第一节 人工血管的的研究背景

1.1.1人工血管的研究背景

第二节 人工血管的制备

1.2.1人工血管材料选择

1.2.2 人工血管的结构设计

1.2.3 静电纺丝技术

1.2.4 血管支架装载和缓释生物活性因子

第三节 血管干细胞在血管新生中的作用

1.3.1血管壁中的干细胞

1.3.2 DKK3在血管新再生中的作用

第四节 本课题的提出

第二章 装载DKK3聚（ε-己内酯）/胶原人工血管（PCL/Col-DKK3）的制备和生物学评价

第一节 实验材料与仪器设备

2.1.1实验材料

2.1.2 仪器设备

2.1.3 试剂配制

第二节 实验方法

2.2.1 装载DKK3的人工血管的制备

2.2.2 对照组PCL/Col人工血管的制备

2.2.3 电纺纯胶原管的制备

2.2.4 人工血管的脱管

2.2.5 SEM观察

2.2.6 胶原的降解

2.2.7 体外平滑肌细胞趋化实验

2.2.8 人工血管的体内移植

第三节 实验结果

2.3.1人工血管纤维形貌的表征

2.3.2 胶原的体内降解

2.3.3 DKK3对平滑肌细胞的趋化作用

2.3.4 体内移植后的取材分析

2.3.5 结论

第三章 装载活性多肽的聚（ε-己内酯）/胶原人工血管（PCL/Col-Peptide）的制备和生物学评价

第一节 实验材料与仪器设备

3.1.1实验材料

3.1.2 仪器设备

3.1.3 试剂配制

第二节 实验方法

3.2.1 静电纺丝溶液的制备

3.2.2 装载多肽的人工血管的制备

3.2.3 人工血管的脱管

3.2.4 SEM观察人工血管的纤维形貌

3.2.5 胶原含量的检测

3.2.6 血管原位移植及取材分析

第三节 实验结果

3.3.1人工血管纤维形貌的表征

3.3.2 体外移植后取材分析

3.3.3 结论

第四章 全文总结和展望

参考文献

致谢

个人简历 在学期间发表的学术论文与研究成果