蜘蛛香总环烯醚萜类成分急性毒性及长期毒性安全性评价研究

摘要

目的:
　　 通过开展蜘蛛香总环烯醚萜类成分的急性毒性实验研究和长期毒性实验研究，对蜘蛛香总环烯醚萜类成分的安全性用药作出评价。
　　 方法:
　　 急性毒性研究中，单次灌胃KM小鼠蜘蛛香总环烯醚萜类成分(3200mg/kg)，并与溶媒对照组(0.5％CMC-Na)比较，持续14天密切观测小鼠的体重、饮食、毒性反应以及死亡率。长期毒性研究中，将SD大鼠随机分为4组，每组40只，雌雄各半，分别为溶媒对照组、蜘蛛香总环烯醚萜类成分低剂量组(24mg/kg.bw)、中剂量组(96mg/kg.bw)和高剂量组(120mg/kg.bw)。每天定时灌胃给药1次，每周给药6天，连续给药3个月。每周测体重、摄食量1次，并根据体重调整给药量，每天进行笼旁观察。于给药第1.5个月、3个月、恢复期两周结束时分别处死动物10只、20只、10只（每组雌雄各半），采血进行血液学、血液生化学、血液电解质等指标检测以及组织病理学检查。
　　 结果:
　　 急性毒性预实验及正式实验研究发现，小鼠对蜘蛛香总环烯醚萜类成分的最大耐受量是3200mg/kg，小鼠没有出现死亡和一般行为的异常，与溶媒对照组相比体重没有显著性差异(P＞0.05)。
　　 长期毒性实验研究结果表明，整个实验周期中大鼠一般行为没有出现异常和死亡情况，各用药组与对照组大鼠的体重相比也没有显著差异(P＞0.05)。饲料消耗量除了第1周雄鼠低剂量组(P＜0.05)、第2周雄鼠低剂量组(P＜0.01)和高剂量组(P＜0.05)及第3周雄鼠低剂量(P＜0.05)和雌鼠高剂量组(P＜0.05)比溶媒对照组高外，其余时期雌雄大鼠各剂量组饲料消耗量与溶媒对照组比较，均无显著性差异(P＞0.05)，开始几周饲料出现消耗差异是动物的过性，以后动物逐渐适应，说明蜘蛛香总环烯醚萜类成分对饲料消耗量无明显影响。
　　 血液学中，实验中期雌性大鼠高剂量组网织红细胞稍高(Ret)(P＜0.05)，但在实验末期和恢复期中未出现差异，说明这是动物的过性，非药物引起的;实验末期，雌性大鼠低剂量组的平均红细胞体积(MCV)(P＜0.01)和平均血红蛋白(MCH)(P＜0.01)比溶媒对照组的高，雌性大鼠中剂量组的平均血红蛋白(P＜0.05)及高剂量组中性粒细胞(N)(P＜0.05)和淋巴细胞(L)(P＜0.05)稍高，但是均在正常范围内波动，说明蜘蛛香总环烯醚萜成分对大鼠血液学无明显影响;血液生化中，实验中期雌性大鼠中剂量组血糖(Urea)偏低(P＜0.05)，但是在正常范围内波动，实验末期雄性大鼠中剂量组尿素氮(Urea)偏低(P＜0.01)，但在正常范围内波动，虽有统计学意义但无生物学意义;恢复期雄性大鼠高剂量组的总胆红素(TBIL)偏高(P＜0.05)，但中剂量却比溶媒对照组低，无量效关系，所以药物的延迟毒性对大鼠总胆红素无明显影响。
　　 脏器系统中，实验中期雌性大鼠中剂量组心脏系数低，但高剂量组未出现差异，在实验末期也未出现心脏系数偏低的现象，这可能是过性，非药物引起的。实验末期，雌性大鼠高剂量脾脏系数增大，但在正常范围内波动，但病例组织学无变化，恢复期也未出现差异;恢复期雌性大鼠中剂量子宫偏大，可能个别雌性大鼠处于动情期，子宫充盈增生引起，高剂量组未出现动物子宫增大，子宫增大与受试物延迟毒性无关。
　　 病理组织学大体解剖发现实验中期、末期、恢复期各受试组动物脏器组织未见明显病理改变。光镜检查发现实验末期大鼠有4例心肌单核细胞浸润和7例肝细胞脂肪变性，恢复期4例肝细胞脂肪变性，属于大鼠的自发病变，并且溶媒对照组发病率高于高剂量组，与蜘蛛香总环烯醚萜类成分药物无毒理相关性。其余各时期各脏器未见明显异常。
　　 结论:
　　 急性毒性研究，小鼠对蜘蛛香总环烯醚萜类成分的最大耐受量是3200mg/kg。长期毒性研究，初步确定蜘蛛香总环烯醚萜类成分长期灌胃给药后，无明显毒性反应，其无毒安全剂量为120mg/kg/天，为临床最大拟用剂量的100倍。说明蜘蛛香总环烯醚萜类成分在临床用药剂量下是安全的。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 蜘蛛香的研究概况

1．1．1 蜘蛛香的资源研究

1．1．2 蜘蛛香的民族用药

1．1．3 蜘蛛香的化学成分

1．1．4 蜘蛛香的药理作用

1．1．5 蜘蛛香的毒理研究

1．1．6 蜘蛛香的开发应用

1．2 药物安全评价研究

1．2．1 药物临床前安全性评价研究概述

1．2．2 急性毒性研究

1．2．3 长期毒性研究

第二章 蜘蛛香总环烯醚萜类成分急性毒性研究

2．1 实验材料

2．1．1 实验动物

2．1．2 实验药物

2．2 观察指标

2．2．1 预试实验

2．2．2 最大耐受量实验

2．3 数据统计方法

2．4 预试实验

2．4．1 实验方法

2．4．2 实验结果

2．4．3 讨论

2．5 最大耐受量实验

2．5．1 实验方法

2．5．2 实验结果

2．5．3 讨论

第三章 蜘蛛香总环烯醚萜类成分长期毒性研究

3．1 实验材料

3．1．1 实验动物

3．1．2 实验药物

3．1．3 实验仪器

3．1．4 主要试剂

3．2 实验方法

3．2．1 动物分组

3．2．2 剂量设计

3．2．3 给药方法

3．2．4 血液样本采集

3．3 指标检测

3．3．1 一般症状观察

3．3．2 体重

3．3．3 饲料消耗量

3．3．4 血液学指标

3．3．5 血液生化学指标

3．3．6 脏器指数及系统尸解

3．3．7 组织病理学

3．4 数据统计处理方法

3．5 实验结果

3．5．1 蜘蛛香总环烯醚萜类成分对大鼠一般状态的影响

3．5．2 蜘蛛香总环烯醚萜类成分对大鼠体重的影响

3．5．3 蜘蛛香总环烯醚萜类成分对大鼠饲料消耗量的影响

3．5．4 蜘蛛香总环烯醚萜类成分对大鼠血液学的影响

3．5．5 蜘蛛香总环烯醚萜类成分对大鼠血液生化学指标的影响

3．5．6 蜘蛛香总环烯醚萜类成分对大鼠脏器的影晌

3．5．7 蜘蛛香总环烯醚萜类成分长期毒性实验病理结果

3．6 讨论

3．6．1 一般状态、体重和饲料消耗

3．6．2 血液学

3．6．3 血液生化学

3．6．4 脏器及组织病理学

结论

致谢

参考文献

硕士期间发表的论文