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石杉碱甲的制备及其药理学和药效学研究

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1引言

2材料和方法

3结果与讨论

4结论

参考文献

致谢

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摘要

本试验选用的千层塔由重庆某药厂提供,试验测定了提取石杉碱甲所需的酸的种类、酸的pH值、提取时间、碱化pH值的单因子实验和萃取次数、萃取倍比的双因子试验,还有在提取生物碱的过程中,为了获得最大提取率,优化酸提倍比、酸提次数、酸提时间、酸提温度这四个参数,故设计了L9(34)正交实验。将提取的石杉碱甲制成灌胃药,给小白鼠灌胃1个月,然后做药效学实验:小鼠跳台实验、小鼠避暗实验,来检测石杉碱甲药效,之后采用不同方法处死小鼠。测定乙酰胆碱含量的小鼠采用瞬间剪头,液氮冷冻后,在冷冻情况下取脑方式,加入9倍体积的2%高氯酸溶液,冷冻保存;测定乙酰胆碱酯酶的活性和测定乙酰胆碱转移酶的活性采用常规断颈方式处死,在加冰解剖盘中常温下取脑方式,然后加入9倍体积的生理盐水,冷冻保存。需要时用超声波粉碎机在冰浴中,400-600W下粉碎5分钟,4000转/分钟离心,取上清液进行药理学实验。结果如下:酸的种类确定为盐酸,酸提pH值为3.0,碱化pH值为9比较合适,氯仿的体积量在10倍原料量,萃取3次,该采用的最佳工艺是酸提固液倍比1/10、酸提时间45分钟、酸提次数3次、酸提温度55℃为最佳。在此条件下,石杉碱甲的提取率普遍能达到79%。 在药效学实验中,利用小鼠跳台实验和小鼠避暗实验检测石杉碱甲是否有促进记忆,改善老年痴呆症症状的药效。把小白鼠制造成三个记忆障碍模型:记忆获得障碍模型、记忆巩固障碍模型、记忆再现障碍模型。从实验结果显示的错误次数、潜伏期的指标来看,高剂量组的作用>中剂量组的作用>低剂量组的作用,通过与空白组、对照组比较,说明石杉碱甲对上述的三个模型都具有不同程度的促进记忆作用。 在药理学实验中,通过测定小白鼠大脑中的乙酰胆碱含量、乙酰胆碱酯酶活性和乙酰胆碱转移酶活性三个指标,来直接证明石杉碱甲具有促进记忆,改善老年痴呆症的药效。利用试剂盒测定结果表明,乙酰胆碱酯酶活性为高剂量组<中剂量组<低剂量组;乙酰胆碱转移酶活性为高剂量组>中剂量组>低剂量组,用羟胺比色法测定乙酰胆碱含量,结果为高剂量组>中剂量组>低剂量组;从直接的指标和间接的指标都显示出,石杉碱甲有促进记忆,改善老年痴呆症症状的药理学作用。

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