DEV基因文库构建、核衣壳蛋白基因的发现及克隆与表达

摘要

本研究以DEVCHv株为基本材料，对该毒株进行了提纯研究和基因组酶切分析；构建了DEV基因文库，经比对发现并克隆、鉴定了其核衣壳蛋白基因；利用该基因片段设计引物，建立了基于DEV核衣壳蛋白基因的一种PCR检测方法；同时将该基因克隆到原核表达载体pET32a中，对其进行了表达及其表达产物抗原性的研究。主要内容包括：　　1.比较了四种方法对DEVChv株的提纯效果，并对病毒结构蛋白进行了初步分析。　　2.对DEVCHv株基因组DNA进行了限制性核酸内切酶分析：通过DEF增殖DEVCHv株后，比较了两种方法对DEV基因组DNA的提取效果。　　3.构建了DEV基因文库，发现了DEV核衣壳蛋白基因并进行了克隆与鉴定。　　4.利用针对DEV核衣壳蛋白基因的一对引物(扩增跨度为1013bp,含完整的DEV衣壳蛋白基因)对DEV强毒CHv株和弱毒CHa株基因组DNA进行扩增，获得了与预期大小相符合的特异性条带，成功建立了检测DEV衣壳蛋白基因的PCR方法。　　5.成功构建了DEV核衣壳蛋白基因的原核表达载体。　　6.利用大肠杆菌作为表达宿主，对DEV核衣壳蛋白基因进行了表达研究，并分析了其表达产物的抗原性。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：资助、ABBREVIATIONS

论文独创性声明及关于论文使用授权的声明

文献综述第一章几种家禽疱疹病毒研究概况

文献综述第二章病毒结构蛋白的功能及其体外表达优化策略

实验研究第三章DEV CHv株的增殖、提纯及其结构蛋白初步分析

摘要

引言

1.材料

2.方法

3.结果与分析

4.讨论

5.小结

实验研究第四章DEV CHv株基因组DNA的限制性内切酶分析

摘要

引言

1.材料

2.方法

3.结果与分析

4.讨论

5.小结

实验研究第五章DEV基因文库构建及核衣壳蛋白基因的发现、克隆与鉴定

摘要

引言

1.材料

2.方法

3.结果与分析

4.讨论

5.小结

实验研究第六章基于DEV核衣壳蛋白基因PCR方法的建立与应用

摘要

引言

1.材料

2.方法

3.结果与分析

4.讨论

5.小结

实验研究第七章DEV核衣壳蛋白基因原核表达载体的构建

摘要

引言

1.材料

2.方法

3.结果与分析

4.讨论

5.小结

实验研究第八章DEV重组核衣壳蛋白在大肠杆菌中的诱导表达及其抗原性初探

摘要

引言

1.材料

2.方法

3.结果与分析

4.讨论

5.小结

结 论

参考文献

致谢

附录1作者简介

附 录2读书期间发表或参与发表论文情况