2种昆虫抗菌肽粗提物对猕猴桃溃疡病菌抑菌作用及猕猴桃溃疡病药剂防治试验

摘要

猕猴桃细菌性溃疡病是猕猴桃生产上的一种毁灭性病害，该病的发生具有范围广、致病性强、传播速度快、根除难度大等特点，给猕猴桃生产造成重大经济损失，严重制约世界猕猴桃产业的健康发展。本论文以苍溪县红阳猕猴桃上的溃疡病为研究对象，对猕猴桃溃疡病菌进行分离与纯化及16S-23S rDNA分子鉴定，研究了2种昆虫抗菌肽粗提物对猕猴桃溃疡病菌抑菌作用，以及猕猴桃溃疡病防治药剂的室内毒力测定和田间防治试验。研究结果如下:
　　1.猕猴桃溃疡病菌的分离与纯化及分子鉴定
　　本试验通过对四川苍溪县猕猴桃主产区主栽品种红阳上采集的5份感病叶片和枝条，进行病原菌分离、纯化;利用猕猴桃溃疡病菌的特异性引物，对分离菌种16S-23S rDNA ITS序列进行PCR扩增、核苷酸序列测定及相似性分析，鉴定出四川苍溪县猕猴桃主产区发生的猕猴桃溃疡病菌为丁香假单胞杆菌猕猴致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)。
　　2.2种昆虫抗菌肽粗提物对猕猴桃溃疡病菌抑菌作用
　　以猕猴桃溃疡病的病原菌丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种(Psa)作为诱导源，通过体壁损伤病原菌感染家蝇（Musca domestica）幼虫和黄粉虫(Tenebriomolitor Linnaeus)的幼虫及蛹诱导产生抗菌肽，并分别在24h和48h进行粗提取，采用滤纸片法测定抗菌肽粗提物对猕猴桃溃疡病菌的抑菌效果。家蝇幼虫和黄粉虫的幼虫及蛹于不同时间点产生的抗菌肽粗提物对Psa均有一定抑制作用，抑菌圈直径极显著大于未诱导组，未诱导组抗菌肽粗提物对Psa无抑制作用。家蝇幼虫和黄粉虫幼虫诱导48h产生的抗菌肽粗提物对Psa的抑菌圈直径大于诱导24h的抑菌圈。
　　3.3种药剂对猕猴桃溃疡病菌的室内毒力测定
　　本试验采用牛津杯水平扩散法测定3种药剂对猕猴桃溃疡病菌的室内毒力，结果表明:溃腐清对溃疡病菌作用最敏感且抑菌效果明显，其EC50值仅为0.1mg/L;其次为噻霉酮，EC50值为139.23 mg/L;农用链霉素不敏感，其EC50值为3318.02mg/L，但噻霉酮和农用链霉素对溃疡病菌的抑菌彻底性优于溃腐清。
　　4.猕猴桃溃疡病的田间防治试验
　　主要对3种药剂采用不同施药方法进行田间防治试验，3种药剂对猕猴桃溃疡病的防效与室内毒力测定差异较大。其中溃腐清和农用链霉素防效大于噻霉酮，噻霉酮的防效极差。在全程喷雾预防试验中，溃腐清防效为26.27％～63.20％，农用链霉素的防效为32.49％，噻霉酮的防效为17.80％;在病斑刮除涂抹治疗中，溃腐清的治愈率为42.50％～54.90％，农用链霉素的治愈率为47.37％，噻霉酮的治愈率为40.23％。综合因素来看，树体全程喷雾的效果最好，灌根治疗几乎无防治效果。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1 猕猴桃和苍溪红心猕猴桃

2 猕猴桃细菌性溃疡病

2．1 分布及危害

2．2 病原

2．3 病害循环

2．4 病害流行因素

3 猕猴桃溃疡病的防治

3．1 农业防治

3．2 化学防治

3．3 生物防治

4 昆虫抗菌肽概述

4．1 种类和特征

4．2 家蝇抗菌肽

4．3 黄粉虫抗菌肽

4．4 抗菌肽的诱导

4．5 昆虫抗菌肽在农业上的应用

5 本研究的目的与意义

第二章 猕猴桃溃疡病菌分离、纯化及分子鉴定

1 材料与方法

1．1 供试材料

1．2 试验方法

2 结果与分析

2．1 PCR扩增产物电泳检测结果

2．2 PCR产物测序结果

2．3 16S-23S rDNA ITS序列系统进化树的构建与分析

3 结论与讨论

第三章 2种昆虫抗菌肽粗提物对猕猴桃溃疡病菌抑菌作用初探

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 试验方法

1．3 数据分析

2 结果与分析

3 结论与讨论

第四章 3种药剂对猕猴桃溃疡病菌的室内毒力测定

1 材料与方法

1．1 供试材料

1．2 试验方法

1．3 数据分析

2 结果与分析

2．1 3种药剂对猕猴桃溃疡病菌的抑制作用

2．2 3种药剂对猕猴桃溃疡病菌抑制作用的持效性

3 结论与讨论

第五章 猕猴桃溃疡病的田间防治试验

1 材料与方法

1．1 试验地概况

1．2 试验药剂

1．3 试验设计

1．4 试验方法

1．5 数据调查与处理

3 结果与分析

3．1 喷雾处理效果

3．2 病斑刮除涂抹治疗结果

3．3 灌根治疗结果

4 结论与讨论

全文总结

1．1 猕猴桃溃疡病菌的分离与纯化及分子鉴定

1．2 2种昆虫抗菌肽粗提物对猕猴桃溃疡病菌抑菌作用

1．3 3种药剂对猕猴桃溃疡病菌的室内毒力测定

1．4 猕猴桃溃疡病的田间防治试验

参考文献

致谢