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盐藻渗透调节与超微结构改变的研究及烯醇酶基因的克隆、分析和转基因烟草的鉴定

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第一章盐藻超微结构的观察及渗透调节力的测定

摘要

引言

1材料和方法

1.1材料

1.2方法

2结果

2.1盐藻的超微结构(见版图)

2.2高盐震动下盐藻细胞结构的变化

2.3盐藻在不同盐浓度下的生长状态

2.4盐藻在渗透震动下的形态变化

3讨论

参考文献

第二章盐藻烯醇酶基因的克隆

摘要

引言

1.材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果

2.1盐藻总RNA的质量分析

2.2简并PCR引物的设计

2.3盐藻烯醇酶基因部分cDNA片段的克隆

2.4盐藻烯醇酶基因全长cDNA的获得

3.讨论

3.1盐藻总RNA提取的改进

3.2简并引物设计的的改进

3.3 RACE技术的局限性及改进与优化

3.4 RACE在植物基因克隆上的技术优势、应用现状及其发展前景

参考文献

第三章烯藻烯醇酶基因的序列分析

摘要

引言

1.方法

1.1序列相似性比对

1.2序列读框分析

1.3蛋白质性质分析

1.4蛋白质一级结构分析

1.5蛋白质高级结构预测

1.6盐藻烯醇酶基因的进化地位分析

2.结果与讨论

2.1 BLASTn

2.2序列读框分析

2.3序列 BLASTx比对结果

2.4最长读框蛋白质性质分析

2.5蛋白质一级结构分析

2.6蛋白质二级结构预测

2.7蛋白质三级结构预测

2.8盐藻烯醇酶基因序列分析及进化地位分析

3. 小结

第四章渗透震动下盐藻藻烯醇酶基因的差异表达

摘要

引言

1.材料和方法

1.1材料

1.2方法

2.结果

2.1总RNA的提取

2.2内标基因的选择及循环参数的确定

2.3渗透震动下烯醇酶基因的差异表达

3. 讨论

参考文献

第五章盐藻烯醇酶基因表达载体的构建及其根癌农杆菌转化

摘要

引言

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1载体pCAMBIA2301G的构建

2.2载体pCAMBIA2301G-enolase的构建

2.3根癌农杆菌的转化

3讨论

参考文献

第六章盐藻烯醇酶基因转化烟草及植株再生

摘要

引言

1.材料和方法

1.1材料

1.2方法

2结果

2.1叶盘法转化烟草

2.2诱导丛生芽

2.3诱导生根

2.4移栽

3 讨论

3.1农杆菌的培养

3.2叶盘法转化烟草

3.3诱导丛生芽

3.4诱导生根

3.5移栽

参考文献

第七章盐藻烯醇酶基因转基因烟草的鉴定

摘要

引言

1.材料与方法

1.1材料

1.2方法

2.结果

2.1 PCR检测

2.2 Southern杂交

2.3 Northren杂交结果

2.4转基因烟草的耐盐功能鉴定

3.讨论

3.1 PCR检测

3.2 DNA样品的制备

3.3电泳、转膜和固定

3.4预杂交和杂交

3.5关于探针制备

参考文献

文献综述

第一节植物的盐胁迫

一、盐胁迫对光能吸收和转换的影响

二、盐胁迫对电子传递的影响

三、盐胁迫对光合碳同化的影响

四、盐胁迫与其它环境胁迫因子的协同影响

第二节植物盐适应的生理机制

一、离子平衡

二、渗透压平衡

三、氧化还原状态的平衡

四、水分平衡

第三节盐胁迫诱导的信号传导途径

一、依赖于植物激素ABA(abscisic acid)的信号传导途径

二、DREB途径

三、SOS 途径

四、蛋白激酶途径

第四节盐藻的耐盐性研究

一、概述

二、盐藻渗透调节机理的研究

第五节耐盐植物研究的方法及展望

一、关于耐盐性研究的模式生物

二、耐盐植物的研究方法及展望

参考文献

致谢

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摘要

杜氏藻(Dunaliella)广泛分布于世界各地的盐湖和海水中,是一种单细胞绿藻,归属于绿藻纲(Chlorophyceae)、绿藻门(Chlorophyta).杜氏藻属的野生生活环境最明显的特点是富含Na<'+>和Cl<'->,尽管从各地分离到的野生型株系对NaCl的承受范围和最适生长浓度有所不同,但还是可以看出它们对NaCl有很大的适应浓度范围.因此中国常称杜氏藻为

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