肝片吸虫保护性抗原基因在卡介苗中的表达

摘要

由肝片吸虫(F.hepatica)引起的疾病是一种全球性的人畜共患寄生虫病,也是中国危害最重的牲畜寄生虫病之一,用疫苗特别是基因工程疫苗来防治肝片吸虫病是一种新战略.分枝杆菌属卡介苗(Bacille Calmette-Guerin,BCG)集佐剂与抗原于一身,在BCG中表达外源疾病抗原基因,从而研制BCG活疫苗或多价疫苗已成为国内外新型疫苗特别是寄生虫疫苗研究的重点和热点.该文叙述了肝片吸虫主要保护性抗原基因FH3重组质粒的构建及其在卡介苗中的表达的研究工作,为开展重组卡介苗肝片吸虫疫苗的研究奠定基础.

目录

前 言

一、材料和方法

1.实验材料

1.1菌株和质粒

1.2培养基

1.3分子克隆工具酶及其它

2.实验方法

2.1质粒DNA的提取

2.2卡介苗的培养

2.3卡介苗总DNA的提取

2.4大肠杆菌的转化

2.5 DNA的限制酶切及凝胶电泳

2.6 DNA片段的回收

2.7质粒DNA的去磷酸化和DNA连接

2.8分枝杆菌的电转化

2.9斑点杂交

2.10外源基因FH3在卡介苗中的表达

二、结果

1.重组穿梭质粒pMV261-FH3的构建与鉴定

2.重组质粒通过电转化进入卡介苗

3.斑点杂交

4.重组表达蛋白的SDS-PAGE

图

三、讨论

1.卡介苗在发展肝片吸虫重组疫苗中的特点和优势

2.卡介苗的培养方法

3.重组穿梭载体的构建

4.影响BCG电转化的几个因素

5.重组蛋白的表达情况

结 论

参考文献

致 谢

综述：重组BCG疫苗的研究进展

一、卡介苗的主要生物学及分子生物学特征

二、卡介苗作为多价疫苗载体的优越性

三、卡介苗表达载体构建的基本原理及方法

四、BCG载体的研究进展

五、重组BCG疫苗的作用机理

六、外源基因在卡介苗中的表达研究

七、rBCG免疫途径对免疫效果的影响

八、重组BCG疫苗的应用

九、重组BCG疫苗研究中的问题

十、卡介苗现存的一些问题及重组BCG疫苗的发展前景

参考文献

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