荧光定量PCR监测造血干细胞移植患者巨细胞病毒感染及抢先治疗的研究

摘要

目的：人巨细胞病毒(HCMV)是人疱疹病毒科属DNA病毒，在发达国家感染率可达30～70％。在正常人体内通常呈潜伏感染，而在免疫功能低下时则可能出现HCMV活跃复制，进而发展为HCMV疾病(如间质性肺炎、肠炎、视网膜炎等)，是异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者发病和死亡的重要原因。目前的常规预防方案是预防性治疗(universalprophylaxis)，即对移植前HCMV血清学阳性的所有患者都进行抗病毒治疗，这能够有效减少HCMV疾病的发生，但长期用药可造成骨髓抑制，并且增加治疗费用。抢先治疗(preemptive therapy)是指对发现有活动性HCMV感染的患者在HCMV疾病出现之前开始的抗病毒治疗，可以避免不必要的治疗，减轻抗病毒药物的副作用，降低费用。这需要依赖快速、敏感、可靠的活动性HCMV感染的监测手段。本研究采用荧光定量PCR法(FQ-PCR)监测 allo-HSCT患者HCMV-DNA拷贝数，了解allo-HSCT患者移植后HCMV感染状况，并根据HCMV-DNA拷贝数判断患者是否存在HCMV的活跃复制，从而决定是否需要抢先治疗。探讨抢先治疗和预防性治疗相比较的优越性，同时比较血浆荧光定量PCR和白细胞荧光定量PCR检测有无差别。 方法：2004年9月～2006年4月在华西医院血液科层流病房住院行异基因造血干细胞移植的23例患者，移植前采用FQ-PCR法和血清学法同时进行血浆HCMV-DNA、白细胞HCMV-DNA、血清HCMV-IgG和HCMV-IgM检测。移植后两周开始采用血浆和白细胞FQ-PCR法对患者进行定点连续监测，每两周采血一次，至移植后半年。如患者血浆HCMV-DNA>10<'3>拷贝/ml则开始抢先治疗，方案为更昔洛韦5mg/kg，q12h，至HCMV-DNA<10<'3>拷贝/ml。并采用配对x<'2>法对血浆和白细胞FQ-PCR检测结果进行统计学比较。 结果：23例allo-HSCT患者移植前22例血清学HCMV-IgG阳性，1例HCNV-IgM阳性，血浆和白细胞FQ-PCR均为阴性。移植后14例患者出现血浆FQ-PCR阳性，16例出现白细胞FQ-PCR阳性，13例血浆和白细胞FQ-PCR均阳性。14例血浆FQ-PCR阳性患者中11例接受了抢先治疗，2例发生HCMV疾病(间质性肺炎)，9例血浆FQ-PCR阴性患者均未发生HCMV疾病。 结论：本研究提示：HCMY活跃感染是allo-HSCT患者移植后常见并发症，容易出现的时间是移植后30～60天；荧光定量PCR是早期检测allo-HSCT患者HCMV活跃感染的有效方法，根据HCMV-DNA拷贝数而开始的抢先治疗与传统的预防性治疗相比，HCMV疾病的发病率无差异，减少了常规预防性应用抗病毒药物的副作用，避免了不必要的治疗，降低了治疗费用。和血浆FQ-PCR相比，白细胞FQ-PCR的检出率更高，但血浆FQ-PCR检测更简便、易行。

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综述 巨细胞病毒疾病治疗的现状和进展

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