甲状旁腺激素（PTH）介导的高转换型肾性骨病的分子机理研究

摘要

肾性骨病(Renal Osteodystrophy,ROD)是慢性肾功能衰竭(CRF)常见、严重、治疗困难的并发症.动物实验已经证实,PTH对骨代谢具有双相作用,即间歇给药促进成骨,而大剂量持续给药则促进骨吸收.在高转换型肾性骨病时,PTH异常增高,病理上以破骨细胞大量增生形成骨吸收陷窝为主要表现.由于OPG/RANKL/RANK系统参与了破骨细胞的活化和成熟,故高转换型肾性骨病中,PTH的溶骨作用是否涉及OPG/RANKL/RANK系统基因和蛋白质表达的调控及其传导通路,从而刺激破骨细胞活化导致的骨吸收,是该研究的目的.第一部分:高转换型肾性骨病中骨保护素及其配体的表达和形态计量学观察结果显示:10例慢性肾衰尿毒症患者经骨病理学检查证实均为高转换型骨病,以破骨细胞活化形成骨吸收陷窝伴或不伴骨矿化不全为特点.免疫组化显示尿毒症患者骨组织中以RANKL阳性表达为主.与正常对照相比,RANKL阳性表达细胞数目呈显著增加趋势,OPG阳性表达细胞数目呈显著减少趋势.骨组织形态计量学分析显示尿毒症患者RANKL的阳性表达细胞数目与骨吸收面积和破骨细胞数目呈显著正相关.提示,高转换型肾性骨病中,PTH的溶骨作用是通过OPG/RANKL/RANK系统介导的.第二部分:人甲状旁腺激素(hPTH)对体外培养胎鼠颅盖骨成骨细胞增殖、分化和骨保护素及其配体表达的影响结果显示:100ng/ml hPTH(1-34)在细胞培养的第5天显著抑制成骨细胞的增殖;在细胞培养的第18天显著抑制成骨细胞的分化;在整个细胞生长期均抑制OPG基因和蛋白质的表达,但能明显上调RANKL基因和蛋白质的表达,且最大效应发生在成骨细胞的分化期.提示,OPG/RANKL/RANK系统介导了PTH的溶骨作用,早期可能与OPG减少,而晚期与RANKL增加有关.第三部分:人甲状旁腺激素(hPTH)对调节骨保护素及其配体基因表达的PKA和PKC传导通路影响的比较研究结果显示:PKA通路抑制剂H-89 30umol/L能显著改变100ng/ml hPTH(1-34)导致的OPG和RANKL基因的表达趋势,表现为上调OPG基因和下调RANKL基因(35％和59％).而PKC通路激动剂和抑制剂对100ng/ml hPTH(1-34)导致的OPG和RANKL基因的表达趋势无影响.提示PTH持续刺激上调RANKL基因,下调OPG基因的表达,主要是通过PKA通路介导的,在此过程中,PKC通路无作用.

目录

第一部分高转换型肾性骨病中骨保护素及其配体的表达和形态计量学观察

引言

材料与方法

结果

讨论

小结

第二部分 人甲状旁腺激素(hPTH 1-34)对体外培养胎鼠颅盖骨成骨细胞增殖、分化和骨保护素及其配体表达的影响

引言

材料和方法

结果

讨论

小结

第三部分 人甲状旁腺激素(hPTH 1-34)对调节骨保护素及其配体基因表达的PKA、PKC传导通路影响的比较研究

引言

材料与方法

结果

讨论

小结

结论

参考文献

骨保护素和肾性骨病

OPG/RANKL/RANK系统的研究进展

博士期间发表文章及参编书籍目录

致谢