染色质重建因子BRG1介导Ile调节牛乳腺上皮细胞乳合成分子机理研究

摘要

试验旨在探究染色质重建因子BRG1(Brahma-related gene1)介导异亮氨酸(Isoleucine,Ile)在奶牛乳腺上皮细胞中影响乳合成分子机理.在细胞中添加不同浓度Ile,采用甘油三酯试剂盒、脂滴染色检测奶牛乳腺上皮细胞(Bovine mammary epithelial cells,BMECs)中乳脂肪含量变化,Western blot检测乳蛋白含量变化及乳合成相关信号通路分子(S6K1和SREBP-1c)表达水平变化;添加磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002与最适浓度Ile后,检测乳合成调节相关蛋白表达;检测添加最适浓度Ile同时敲低BRG1对乳蛋白、乳脂肪合成相关信号通路分子影响.结果 表明,Ile以剂量依赖性方式促进BMECs乳合成.BRG1正向调控S6K1磷酸化和SREBP-1c表达.Ile显著上调BRG1蛋白水平,而抑制PI3K途径后BRG1蛋白水平显著下降,且Western blot结果显示添加Ile通过PI3K途径调控S6K1磷酸化和SREBP-1c蛋白表达.综上,染色质重建因子BRG1可介导Ile通过调控S6K1磷酸化和SREBP-1c表达,调节BMECs中乳蛋白和乳脂肪合成.