基质金属蛋白酶（MMP-7，MMP-2）基因沉默抑制胃癌细胞侵袭转移的实验研究

摘要

在动物实验中，MMP-7和MMP-2抑制剂已被证明可抑制某些肿瘤的转移，然而MMP-7及MMP-2在转录和翻译水平抑制剂尤其是RNA干扰对胃癌的抑制作用，仍不清楚。本研究着重探讨不同胃癌细胞系的MMP-7及MMP-2的表达及其腹腔种植能力的关系，MMP-7siRNA及MMP-2siRNA对胃癌侵袭转移的生物学行为的影响，以较为系统地阐述MMPs在胃癌侵袭转移中的作用。材料与方法：采用实时荧光定量RT-PCR和ELISA方法，在转录和翻译水平比较不同胃癌细胞系MMP-7及MMP-2的mRNA及蛋白质表达为我们下面实验提供理论基础。将胃癌细胞直接注入裸鼠腹腔，建立腹膜种植模型，通过观察生存时间等方法，比较不同胃癌细胞系的腹膜种植潜能。选出既较高表达MMP-7和MMP-2又具高腹腔种植潜能的胃癌细胞系，预先将化学合成的MMP-2siRNA、MMP-7siRNA与肿瘤细胞在细胞培养箱中作用24h,48h和72h然后在3个不同时间点，应用半定量RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR、ELISA方法，侵袭试验研究RNA干扰前后胃癌细胞MMP-7及MMP-2表达和侵袭能力变化，探讨MMPs对胃癌细胞腹腔侵袭转移生物学行为及RNA干扰对其的抑制作用。在裸鼠活体内给予被MMPsiRNA干扰后的胃癌细胞腹腔注射，观察其对胃癌细胞腹腔种植转移是否有抑制作用，并初步探讨siRNA在此方面的作用机制。

目录

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前 言

第一部分胃癌细胞中MMP-7和MMP-2表达水平与其侵袭转移能力关系的实验研究

引言

材料和方法

结果

讨论

第二部分siRNA抑制胃癌细胞MMP-7,MMP-2表达的实验研究

引言

材料和方法

结果

讨论

第三部分siRNA对胃癌细胞MKN45侵袭转移体内外抑制的实验研究

引言

材料与方法

结果

讨论

结 论

参考文献

致 谢

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