基质金属蛋白酶-1基因沉默抑制人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞ACC-M侵袭转移的研究

摘要

本研究以涎腺腺样囊性癌(SACC)细胞系ACC-2及其肺高转移株ACC-M作为研究肿瘤转移分子机制的模型，首先采用基因芯片技术筛选不同转移力细胞的差异表达基因，从中选择转移相关靶基因，应用RNAi技术沉默其表达，一方面观察靶基因敲除对细胞生物学特性的影响，另一方面为肿瘤基因治疗提供思路。筛选发现基质金属蛋白酶-1(MMP-1)基因在ACC-M细胞中高表达。MMP-1是MMPs家族中表达最高的降解纤维胶原的间质胶原酶，许多肿瘤组织中有MMP-1的过表达，其表达与侵袭转移及不良预后相关，但MMP-1与SACC的相关性研究未见报道。本研究即以MMP-1为靶基因进行RNAi研究。

目录

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资助

缩略语表

前言

文献回顾

一关于涎腺腺样囊性癌

二肿瘤侵袭转移分子机制的研究

三基质金属蛋白酶1（MMP-1）的研究现状

四RNA干扰与肿瘤

参考文献

第一部分人涎腺腺样囊性癌细胞转移相关基因的筛选

实验一、基因芯片筛选人涎腺腺样囊性癌细胞转移相关基因

1.材料和方法

2.结果

实验二、RT-PCR验证基因芯片筛选结果

1.材料和方法

2.结果

实验三、MMP-1在人涎腺腺样囊性癌高低转移细胞中的表达

1.材料和方法

2.结果

讨论

参考文献

第二部分用RNAi技术沉默ACC-M细胞中MMP-1基因的表达

实验一、MMP-1shRNA真核表达载体的构建

1.材料和方法

2.结果

实验二、MMP-1shRNA真核表达载体稳定转染细胞株的建立

1.材料和方法

2.结果

讨论

参考文献

第三部分MMP-1基因沉默对ACC-M细胞生物学特性的影响

实验一、MMP-1基因沉默对ACC-M细胞形态学特性的影响

1.材料和方法

2.结果

实验二、MMP-1基因沉默对ACC-M细胞增殖特性的影响

1.材料和方法

2.结果

实验三、MMP-1基因沉默对ACC-M细胞侵袭转移特性的影响

1.材料和方法

2.结果

讨论

参考文献

小结

个人简历

攻读博士期间发表论文情况

致谢