原发性视网膜色素变性家系和Usher综合征家系临床表型分析及致病基因研究

摘要

目的： 1．建立视网膜色素变性遗传资源收集保存的标准化操作程序。 2．分析3个RP家系RP-GC-001、RP-DX-002、RP-PG-003临床表型及遗传学特点，寻找致病基因突变。 3．分析2个Usher综合征家系USH-001、USH-002的临床表型特征及遗传学特点，筛选可能的已知致病基因位点。 方法： 1．对RP患者进行鉴定和临床分型，分析其遗传方式。收集、保存RP遗传资源，包括患者及家属的知情同意、填写RP调查表、抽取外周静脉血制备基因组DNA的、提取基因组DNA、保存及鉴定基因组DNA。建立RP遗传资源库，包括纸质档案管理系统和电子档案管理系统。 2．分析RP-GC-001、RP-DX-002、RP-PG-003家系患者的临床表型特征、系谱特征，利用PCR扩增和直接测序的方法并对RHO、RDS、ROM1、NRL、CRX等5个已知致病基因的15个外显子进行筛查。 3．分析USH-001、USH-002家系患者的临床表型特征、系谱特征，利用连锁分析的原理和方法，对12个已知致病基因位点周围的微卫星标记进行扫描，筛选可能的致病基因位点。 结果： 1．建立了规范、科学、合理，并且符合国际、国内遗传资源采集研究原则要求的视网膜色素变性遗传资源收集保存标准化操作系统。 2．RP-GC-001、RP-PG-002、RP-DX-003表型具有共性：夜盲、进行性视野缩小、视网膜骨细胞状色素沉着、视乳头呈蜡黄色萎缩，表型垂直连续传递，男女均可发病。同时又具个性特征：RP-DX-002家系中患者视网膜骨细胞样色素沉着累及黄斑区和视乳头旁，多个患者伴有虹膜局限性前粘连、玻璃体烟灰样混浊。RP-PG-003家系患者在50岁左右出现急性闭角型青光眼。RP-GC-001家系中发现了RHO基因外显子2编码区403C＞T Arg135Trp R135W突变。RP-PG-002、RP-DX-003家系的RHO、RDS、ROM1、NRL、CRX基因未发现致病突变。 3．USH-001、USH-002家系均表现为儿童期出现的双耳听力下降，为非渐进性、中-重度感音神经性耳聋，以高频听力损失为主，前庭功能正常。10-13岁出现夜盲症状，随年龄增长夜盲逐渐加重，并出现视野逐渐缩窄至管状视野，中心视力下降不明显，临床表现符合USH2型。表型未出现连续遗传的现象，男女均有发病，患者的子女表型正常。USH-001家系中所有患者的D11S902、D17S785微卫星标记的Allele值完全一致，USH-002家系所有患者的微卫星标记D1S425、D9S1776的Allele值完全一致。 结论： 1．视网膜色素变性遗传资源收集保存标准化操作系统的建立，确保了本研究的规范性、保证了遗传资源搜集工作良好的延续性以及我们后续基因定位克隆、分子流行病学研究、基因筛查工作结果的真实可靠。 2．RP-GC-001、RP-PG-002、RP-DX-003为常染色体显性遗传RP家系。RHO基因外显子2编码区403C＞T Arg135Trp R135W突变为RP-GC-001家系的致病突变。RHO、RDS、ROM1、NRL和CRX不是RP-PG-002、RP-DX-003家系的致病基因。 3．USH-001、USH-002家系为USH2型家系，遗传方式为常染色体隐性遗传。USH1C、USH1G可能为USH-001家系的致病基因：USH2A、USH2D可能为USH-002家系的致病基因。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

前言

第一部分视网膜色素变性遗传资源收集保存标准化操作系统的建立

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分三个常染色体显性遗传视网膜色素变性家系临床表型分析及致病基因的筛查研究

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第三部分两个Usher综合征家系临床表型分析与致病基因定位研究

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述1 视网膜色素变性的遗传学研究概况

综述二 视网膜色素变性家系基因定位克隆策略

附录

个人简历

致谢