肾康注射液对高糖培养肾小球系膜细胞周期异常的调节作用

摘要

目的:观察中药复方制剂肾康注射液对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞周期异常的调节作用及其机制,探讨肾康注射液对早期DN的防治作用.方法:将体外培养的正常大鼠小球系膜细胞分为7组,分别为正常组、高糖组、甘露醇组、苯那普利组和不同剂量肾康注射液治疗组,每组设3个复孔,共培养72小时.应用流式细胞术观察细胞周期分布、RNA/DNA比值、细胞大小;ELISA法测定培养细胞上清液中FN的含量;RT-PCR检测各组细胞TGF-β<,1>mRNA、P<'21>mRNA的表达.结果:(1)高糖培养肾小球系膜细胞周期分布异常,G<,1>期细胞比例增高,G<,2>期、S期比例下降,RNA/DNA比值增高,以及细胞体积增大;肾康注射液高剂量组可以使细胞周期分布、RNA/DNA比值趋于正常,并能抑制细胞体积增大.(2)高糖培养系膜细胞FN合成及分泌增多,肾康注射液高剂量组能抑制FN的过度合成及分泌.(3)高糖培养系膜细胞TGF-β<,1>mRNA、P<'21>mRNA表达增加,肾康注射液可以抑制TGF-β<,1>mRNA、P<'21>mRNA过度表达,高剂量组作用优于苯那普利.结论:(1)高糖培养肾小球系膜细胞出现细胞周期异常改变,表现为细胞停滞在G<,1>期,细胞肥大,FN合成及分泌增多;肾康注射液可以改善细胞周期异常改变,促使细胞周期正常运转,肥大减轻,FN异常合成及分泌减少.(2)肾康注射液在转录水平影响系膜细胞TGF-β<,1>以及P<'21>合成,从而促使细胞周期正常运转,可能是肾康注射液调节高糖培养肾小球系膜细胞周期异常的重要机理.

目录

缩写词表

引言

实验研究

实验一

1.材料与方法

2.结果与分析

实验二

1.材料与方法

2.结果与分析

实验三

1.材料与方法

2.结果与分析

讨论

1.阳性对照药的选择

1.1血管紧张素Ⅱ在DN肾小球硬化中的作用

1.2 ACEI对DN肾小球硬化的防治作用

2.肾康注射液的立法依据

3.MC周期改变在早期DN中的意义

3.1MC肥大是DN早期的病理学特征之一

3.2 MC周期的异常改变导致细胞肥大

3.3 MC周期改变促使肾小球硬化的发生发展

4.SKI防治DN肾小球硬化的机制探讨

4.1高糖对MC周期的影响及SKI的调节作用

4.2高糖导致MC周期异常的机制及SKI的调节作用

4.3高糖对系膜细胞分泌细胞外基质的影响及SKI的调节作用

5.问题与展望

结论

致谢

附图

参考文献

综述