血府逐瘀汤对高糖培养下人肾小球系膜细胞的调节作用——基于对分泌TGF-β1和LN的影响

摘要

目的：探讨血府逐瘀汤对糖尿病肾病的作用及机制。 方法：借助肾小球MC体外培养技术,采用血清药理学方法,对高糖培养人肾小球系膜细胞进行血府逐瘀汤干预试验,观察其对人。肾小球系膜细胞分泌转化生长因子β1 (TGF-β1)及层粘连蛋白(LN)的影响。健康志愿者7人,年龄、体重均接近,给予血府逐瘀汤口服,制备含药血清。正常人血清采自健康志愿者未服药前(前后对照)。实验分为七组,分别为对照组(第A组)、高糖培养组(第B组)、高糖加正常人血清组(第C组)、高糖加含中药低浓度血清组(第D组)、高糖加含中药中浓度血清组(第E组)、高糖加含中药高浓度血清组(第F组)、高糖加辛伐他汀组(第G组),分别给予各组培养液,分别培养24、48、72h提取培养液上清,-20℃保存备用。采用双抗夹心ELISA法测定转化生长因子β1 (TGF-β1)含量。采用RIA法测定层粘连蛋白(LN)含量。并计算24小时抑制率。 结果：与第A组相比,第B组系膜细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1)及层粘连蛋白(LN)增加(P<0.01);与第B组相比,第C组系膜细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1)及层粘连蛋白(LN)未受到抑制(P>0.05);与第B组相比,第D、E、F组的系膜细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1)及层粘连蛋白(LN)均受到抑制(P<0.01),并呈剂量依赖性,与第B组相比,第G组的系膜细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1)及层粘连蛋白(LN)亦受到抑制(P<0.0 1);第E组对于系膜细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1)及层粘连蛋白(LN)的抑制与第G组相比无明显差异(P>0.05)。 结论： (1)肾小球系膜细胞(MC)可能是血府逐瘀汤发挥治疗作用的重要靶细胞,这可能是该方防治糖尿病肾病的机制之一。 (2)不同浓度的血府逐瘀汤可抑制体外高糖环境下培养的MC分泌转化生长因子β1 (TGF-β1)及层粘连蛋白(LN),且呈剂量依赖性。 (3)血府逐瘀汤抑制肾小球系膜细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1)及层粘连蛋白(LN),可能是该方能够明显抑制高糖培养的人肾小球系膜细胞(MC)分泌细胞因子及细胞外基质(ECM)的部分作用机理。

目录

论文说明：缩略词表

声明

前 言

综述

(一)TGF-β1与糖尿病肾病关系及中医药研究进展

1.TGF-β1在DN发病中的作用

2.DN时TGF-β1的变化

3.中医药在DN中拮抗TGF-β1研究的进展

4.展望

(二)层粘连蛋白(LN)与糖尿病肾病关系的探讨

1、层粘连蛋白(LN)简介及作用

2.层粘连蛋白(LN)与糖尿病肾病关系

3.小结

(三)中医对糖尿病肾病血瘀证的认识

1.古代医家对病因病机的认识

2.现代医家对DN病因病机的认识

实验研究 材料与方法

1.材料

2.实验方法

结 果

一、血府逐瘀汤对高糖培养下人肾小球系膜细胞活力的影响

二、血府逐瘀汤对高糖培养下人肾小球系膜细胞产生转化生长因子β1(TGF-β1)的影响(见表1)

三、血府逐瘀汤对高糖培养下人肾小球系膜细胞分泌层粘连蛋白(LN)的影响(见表2)

讨 论

(一)糖尿病肾病时TGF-β1及LN的变化及血府逐瘀汤的干预作用

(二)血府逐瘀汤的组方特点及对糖尿病肾病的作用

(三)系膜细胞在糖尿病肾病发生发展中的作用

(四)中药血清药理学方法应用于肾小球系膜细胞研究的优势

(五)血府逐瘀汤治疗糖尿病肾病存在的问题及展望

结论

致 谢

参考文献

攻读硕士期间发表过的论文

个人简历