固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗细胞凋亡及其相关基因表达影响的实验研究

摘要

目的：结合动物实验在病理形态、分子生物学等方面的情况，从基因水平上观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗细胞凋亡的调控机制及疗效，为临床防治感音神经性耳聋提供部分理论依据，并为中医肾与耳的理论注入新的内容。 方法：将耳廓反应灵敏的健康SD大鼠随机选取10只用于空白对照组，其余50只用于肾阳虚造模。肾阳虚模型依据邝氏采用氢化可的松注射液臀部肌肉交替注射的方法复制。造模14天后，随机分为模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、桂附地黄丸组，结合预留的空白组共计6组。治疗组造模结束后开始给药，连续给药15天。实验期间，观察大鼠的一般情况、摄食量、体重等；并在给药第15天每组随机选取6只大鼠测试听性脑干反应（ABR），随后处死动物。股动脉取血测试血液流变学、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)；在超净工作台上剥离耳蜗，去除周围组织，左侧耳蜗行HE染色，在光镜下观察内耳的病理形态变化，右侧耳蜗置液氮中冷冻，－70℃冰箱保存备用，用于提取mRNA，并逆转录为cDNA，用RT-PCR法测定bcl-2、bax、Fas、NF-kBp65、HSP70，其mRNA的表达。 结果：各治疗组对肾阳虚大鼠的症状都有不同程度的改善，但以中药高剂量组为最佳，中药低剂量组最差。中药组动物ABR阈值降低，Ⅰ、Ⅲ波潜伏期及Ⅰ-Ⅲ波间期均较模型组明显缩短（p<0.01），并能降低全血高切粘度、中切粘度、低切粘度 (P<0.01)，改善耳蜗微循环。固肾培元方可使肾阳虚大鼠耳蜗bcl-2 mRNA表达增强，baxmRNA表达减弱，bcl-2/bax比例增加，上调HSP70mRNA、NF-kBp65mRNA的表达，下调FasmRNA的表达。 结论：固肾培元方对肾阳虚大鼠具有改善听力、降低血液粘度、改善耳蜗微循环等治疗作用，并能调节耳蜗相关凋亡因子mRNA的表达，通过多途径、多靶点机制而达到改善肾阳虚大鼠听力、保护耳蜗结构与功能的目的。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩 略 词 表

声明

前 言

1 实验材料

2 实验方法

3 观察指标及检测方法

4 统计学处理

5 实验结果与分析

6 讨论

结 论

问题与展望

参考文献

附 图

综述：中医药治疗感音神经性耳聋的研究进展

致 谢

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