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地黄多糖、车前子多糖、淫羊藿多糖及菟丝子多糖对成体大鼠肝脏干细胞生长影响的研究

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第一部分 地黄多糖、车前子多糖、淫羊藿多糖及菟丝子多糖对大鼠肝脏干细胞生长活性的影响

第二部分 淫羊藿多糖、菟丝子多糖环境下大鼠肝脏干细胞向肝细胞分化过程中HNF4α mRNA表达的观察

第三部分 讨论

第四部分 参考文献

第五部分 文献综述 肝肾同源理论的现代研究进展

致 谢

在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

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摘要

目的:通过观察同归肝肾经的四种中药的水溶性成分:地黄多糖、车前子多糖、淫羊藿多糖及菟丝子多糖对成体大鼠肝脏干细胞生长、分化情况的影响,从而更好地理解传统中药学归经理论,并验证“肝肾同源”学说是否以药理学为基础。 方法:将喂养含3’-甲基二甲胺基偶氮苯(3′-Me-DAB)饲料4周的SD大鼠肝脏,通过灌注消化、梯度离心等方法制备成体大鼠肝脏干细胞。通过分离纯化、传代增殖、倒置显微镜下观察细胞形态和生长情况。研究不同浓度的地黄多糖、车前子多糖、淫羊藿多糖及菟丝子多糖对肝脏干细胞的生长,增殖及其分化情况的影响。用四氮唑盐法(MTT比色法)监测肝脏干细胞的生长活性,RT-PCR法检测经中药有效成分诱导后成体大鼠肝脏干细胞的HNF4αmRNA的表达情况。 结果:MTT比色法结果显示:淫羊藿多糖、菟丝子多糖在特定的浓度下能提高肝脏干细胞活性,促进细胞增殖;地黄多糖、车前子多糖在特定浓度区间内不能促进细胞生长及增殖。RT-PCR结果显示:经特定浓度下的淫羊藿多糖、菟丝子多糖诱导后,细胞的HNF4αmRNA表达明显增强。 结论:(1)特定浓度下淫羊藿多糖、菟丝子多糖可促进成体大鼠肝脏干细胞的增殖。在一定浓度区间内地黄多糖、车前子多糖对肝脏干细胞的增殖无影响。提示性寒凉的“中药多糖”对细胞的生长和代谢无明显的促进作用。(2)经淫羊藿多糖、菟丝子多糖环境诱导后,细胞的HNF4αmRNA表达明显增加,提示在性温热的“中药多糖”的诱导下,肝脏干细胞生长活性增强的同时,其向肝脏细胞的分化趋势也十分明显。

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