独活寄生丸及颗粒的质量控制与评价研究

摘要

独活寄生汤为传统古方，载于《备急千金要方》，功能祛风湿、止痹痛、益肝肾、补气血，主要用于治疗风寒湿痹，腰膝冷痛、屈伸不利。目前以该方剂制成的中药成方制剂有独活寄生丸、独活寄生颗粒、独活寄生合剂。其中独活寄生丸与独活寄生颗粒质量控制标准极不完善与统一，难以控制产品质量，严重影响该古方剂临床应用的有效性与安全性。因此，独活寄生丸与独活寄生颗粒的质量标准提高被列为提高国家药品标准行动计划的子课题之一。
　　本课题采用指标成分定性定量的方法，对独活寄生丸与独活寄生颗粒的质量标准进行了全面系统的研究，实现了独活寄生丸与独活寄生颗粒标准的提高与统一，为其质量控制与评价提供了依据。具体研究内容包括以下几个方面:
　　1.独活寄生丸及颗粒与质量标准建立有关的基础研究
　　进行了独活寄生丸及颗粒与质量标准建立有关的基础研究，包含处方分析，处方组成、处方剂量，从而确定建立鉴别与含量测定方法的药味;原料药材质量标准研究，以确保原料药材质量稳定;处方药材研究，从而为定性定量指标成分的选择提供依据;制备工艺研究，根据工艺路线分析指标成分的可行性;独活寄生丸及颗粒标准研究的准备工作，包括原药材、成品、标准品的准备;以及阴性对照样品的制备。
　　2.独活寄生丸质量标准研究
　　本课题在充分分析独活寄生丸处方组成、制法及原质量标准的基础上，重点进行了鉴别项与含量测定项的研究工作:
　　鉴别项对原标准已有的显微鉴别进行了方法学验证，对本方涉及的十五味药进行了TLC鉴别研究，最终建立了独活寄生丸中独活、川芎、当归、白芍、秦艽、地黄六味药的TLC鉴别方法，所建立的方法准确灵敏、专属性强、重现性好，能有效鉴别制剂的真伪。
　　含量测定项建立了独活寄生丸中君药指标成分蛇床子素的HPLC测定方法，流动相为乙腈-水(43∶57)，检测波长为322nm，线性范围为0.0503～4.024μg(r=0.9998)，回收率为98.6％，RSD为1.44％;建立了秦艽中指标成分龙胆苦苷和马钱苷酸含量测定的HPLC测定方法，流动相为乙腈—0.1％磷酸溶液(9∶91)，检测波长为236nm，龙胆苦苷的线性范围为0.6408～6.408μ g(r=0.9994)，回收率为99.85％，RSD为0.24％，马钱苷酸的线性范围为0.0384～1.9198μ g(r=0.9993)，回收率为98.43％，RSD为1.4％;建立了白芍中指标成分芍药苷含量测定的HPLC测定方法。流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(12∶88)，检测波长为230nm，线性范围为0.1274～5.096μ g(r=0.9998)，回收率为102.03％，RSD为1.8％。所建立的方法准确灵敏、专属性强、重现性好，能有效地控制独活寄生丸中独活、秦艽、白芍的质量。
　　同时，本课题还开展了制剂通则丸剂检查项的方法学验证工作。
　　3.独活寄生颗粒质量标准研究
　　本课题在充分分析独活寄生颗粒处方组成、制法及原质量标准的基础上，重点进行了鉴别项与含量测定项的研究工作:
　　鉴别项对原标准中已有TLC鉴别的独活、川芎、当归、白芍、甘草、防风五味药进行了方法学验证，在对其他药味系统研究的基础上增加了秦艽的TLC鉴别方法，所建立的方法简单灵敏、专属性强、重现性好，能有效的鉴别制剂的真伪。
　　含量测定项建立了独活寄生颗粒中秦艽的指标成分龙胆苦苷和马钱苷酸含量测定的HPLC测定方法，流动相为乙腈—0.1％磷酸溶液(9∶91)，检测波长为236nm，龙胆苦苷的线性范围为0.6408～9.612μ g(r=0.9994)，回收率为99.98％，RSD为2.18％。马钱苷酸的线性范围为0.0384～1.9198μg(r=0.9993)，回收率为101.29％，RSD为1.7％;建立了白芍中指标成分芍药苷含量测定的HPLC测定方法。流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(12∶88)，检测波长为230nm，线性范围为0.1274～5.096μg(r=0.9998)，回收率为100.22％，RSD为0.8％.所建立的方法准确灵敏、专属性强、重现性好，能有效地控制独活寄生颗粒中秦艽、白芍的质量。
　　同时，本课题还开展了制剂通则颗粒检查项的方法学验证工作。
　　4.独活寄生丸与独活寄生颗粒标准的建立与统一
　　以独活寄生丸与独活寄生颗粒标准研究的成果，建立了独活寄生丸与独活寄生颗粒的质量标准，经重庆药检所复核，两标准方法可行，重现性好，能有效控制制剂质量。
　　综上所述，本课题采用指标成分定性定量的方法，完善提高并统一了独活寄生丸与独活寄生颗粒的质量标准。其中独活寄生丸的TLC鉴别项和含量测定项在该制剂中为首次采用。本课题所建立的标准方法准确灵敏、简单可行、专属性强、重现性好，为独活寄生丸与颗粒的质量控制与评价提供了可靠依据。

目录

摘要

前言

第一部分 独活寄生丸及颗粒质量标准研究的基础研究工作

1．1 处方组成与处方分析

1．2 处方中各原料药材的质量标准

1．2．1 独活的质量标准

1．2．2 秦艽的质量标准

1．2．3 细辛的质量标准

1．2．4 桂枝的质量标准

1．2．5 防风的质量标准

1．2．6 白芍的质量标准

1．2．7 桑寄生的质量标准

1．2．8 当归的质量标准

1．2．9 川芎的质量标准

1．2．10 熟地黄的质量标准

1．2．11 党参的质量标准

1．2．12 杜仲的质量标准

1．2．13 川牛膝的质量标准

1．2．14 茯苓的质量标准

1．2．15 甘草的质量标准

1．3 处方药材所含主要成分及其理化性质

1．3．1 独活的主要成分及其理化性质

1．3．2 秦艽的主要成分及其理化性质

1．3．3 细辛的主要成分及其理化性质

1．3．4 桂枝的主要成分及其理化性质

1．3．5 防风的主要成分及其理化性质

1．3．6 白芍的主要成分及其理化性质

1．3．7 桑寄生的主要成分及其理化性质

1．3．8 当归的主要成分及其理化性质

1．3．9 川芎的主要成分及其理化性质

1．3．10 熟地黄的主要成分及其理化性质

1．3．11 党参的主要成分及其理化性质

1．3．12 杜仲的主要成分及其理化性质

1．3．13 川牛膝的主要成分及其理化性质

1．3．14 茯苓的主要成分及其理化性质

1．3．15 甘草的主要成分及其理化性质

1．4 制备工艺研究

1．5 独活寄生丸及颗粒标准研究的物质准备工作

1．5．1 原药材

1．5．2 成品

1．6 阴性对照样品

1．6．1 独活寄生丸阴性对照样品

1．6．2 独活寄生颗粒阴性对照样品

1．7 标准物质

1．8 结果与讨论

第二部分 独活寄生丸质量标准研究

2．1 仪器与材料

2．2 鉴别

2．2．1 显微鉴别

2．2．2 独活的TLC鉴别

2．2．3 当归、川芎的TLC鉴别

2．2．4 白芍的TLC鉴别

2．2．5 秦艽的TLC鉴别

2．2．6 熟地黄的TLC鉴别

2．2．7 其他薄层鉴别研究

2．3 检查

2．3．1 马兜铃酸含量测定

2．3．2 通则检查

2．3．3 重金属检查

2．3 含量测定

2．3．1 独活的含量测定

2．3．2 秦艽的含量测定

2．3．3 白芍的含量测定

2．4 结论与讨论

2．4．1

2．4．2

2．4．3

2．4．4

2．5 含量测定附图

第三部分 独活寄生颗粒的质量标准研究

3．1 仪器与材料

3．2 鉴别

3．2．1

3．2．2 秦艽的薄层鉴别研究

3．2．3 其他薄层鉴别研究

3．3 检查

3．3．1 马兜铃酸含量测定

3．3．2 通则检查

3．3．3 重金属检查

3．4 含量测定

3．4．1 秦艽的含量测定

3．4．2 白芍的含量测定

3．4 结论与讨论

3．4．1

3．4．2

3．4．3

3．5 含量测定附图

结论

参考文献

致谢

在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

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