复方保肾颗粒治疗慢性肾小球肾炎的药效及作用机制研究

摘要

目的：
　　本研究通过观察复方保肾颗粒对家兔阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）免疫复合型肾炎模型和大鼠阿霉素肾炎模型的尿蛋白、血肌酐、尿素氮及肾脏结构病理改变的影响，相关蛋白因子水平的调节，探讨该药对慢性肾小球肾炎（后称慢性肾炎，CGN）的治疗作用，揭示其防治CGN的作用机制。
　　方法：
　　1.连续6周给家兔耳缘静脉注射阳离子化牛血清白蛋白制得肾炎模型，将动物分为空白对照组、模型对照组、醋酸地塞米松组、复方保肾颗粒1.2g/kg、0.6 g/kg、0.3 g/kg剂量组，灌胃给药10周后，检测动物尿蛋白、血清肌酐、尿素氮浓度及肾脏病理等指标的变化，免疫组化法检测肾脏中白介素-6（IL-6）、细胞间粘附因子-1（ICAM-1）的蛋白表达情况，观察复方保肾颗粒对兔C-BSA型肾炎模型的治疗作用。
　　2.单次给大鼠尾静脉注射盐酸多柔比星5mg/kg，两周后制得肾炎模型，将动物分为空白对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组、复方保肾颗粒1.5g/kg、0.75 g/kg、0.375 g/kg剂量组，灌胃给药4周后，检测动物尿蛋白、血清肌酐、尿素氮浓度及肾脏病理等指标的变化，免疫组化法检测肾脏中足突裂孔隔膜蛋白（Nephrin）、转化生长因子β1（TGF-β1）的表达情况，观察复方保肾颗粒对大鼠阿霉素肾炎模型的治疗作用。
　　结果：
　　1.复方保肾颗粒1.2g/kg剂量组能显著C-BSA型肾炎家兔的尿蛋白含量（p<0.05或p<0.01）；复方保肾颗粒1.2g/kg、0.6g/kg剂量组血肌酐含量明显降低（p<0.01），；复方保肾颗粒1.2g/kg剂量组（p<0.05）尿素氮含量明显降低。
　　2.复方保肾颗粒1.2g/kg剂量组能改善C-BSA型肾炎家兔肾脏的组织病理变化如肾小管扩张，肾小管萎缩，肾小管上皮细胞变性坏死，肾小管管型，肾间质淤血出血，肾间质纤维化，肾间质水肿，肾间质炎症等情况得到明显改善(p<0.05)；MOSSON染色结果显示家兔肾间质纤维结缔组织增生、各剂量组SPA染色结果显示肾小球基底膜明显增厚，肾小球固塞、闭塞，肾小囊扩张，肾小管扩张和水肿等情况均得到明显改善。
　　3.复方保肾颗粒1.2g/kg剂量组家兔肾脏组织ICAM-1、IL-6积分光密度（MID）显著降低(P<0.05)。
　　4.复方保肾颗粒1.5g/kg、0.75g/kg剂量组动物能降低大鼠阿霉素肾炎模型的尿蛋白含量，其中1.5g/kg在给药后1、2、3周都有明显的降低（p<0.05），0.75g/kg剂量组在给药后两周也出现了明显的降低；复方保肾颗粒1.5g/kg剂量组能明显降低大鼠血肌酐含量（p<0.01）；复方保肾颗粒1.5g/kg、0.75g/kg剂量能显著降低大鼠血尿素氮含量（p<0.01）。
　　5.阿霉素肾炎大鼠HE染色检测：1.5g/kg剂量组2例（2/9）、0.75g/kg剂量组4例（4/10）、0.375g/kg剂量组2例（2/10）大部分肾小管细胞肿胀，空泡变性明显，官腔内可见明显蛋白管型。各组其余肾脏组织肾被膜完整，1.5g/kg剂量组肾小球系膜增生不明显，0.375g/kg剂量组肾小球部分系膜细胞轻度增生；其余动物肾小管细胞肿胀空泡变性、管腔内蛋白管型及间质炎细胞浸润程度1.5g/kg剂量<0.75g/kg剂量<0.375g/kg剂量；复方保肾颗粒1.5g/kg剂量组大鼠肾脏肾间质纤维结缔组织增生明显改善，表现为MASSON染色平均光密度降低(p<0.05)；复方保肾颗粒各剂量组SPA染色结果显示肾小球基底膜明显增厚，肾小球固塞、闭塞，肾小囊扩张，肾小管扩张和水肿等情况均得到明显改善。
　　6.复方保肾颗粒1.5g/kg剂量组大鼠肾脏组织Nephrin积分光密度（MID）显著提升(p<0.05)；复方保肾颗粒1.5g/kg、0.75 g/kg剂量组大鼠肾脏组织TGF-β1含量降低（p<0.05）。
　　结论：
　　家兔C-BSA型免疫复合型肾炎模型和大鼠阿霉素肾炎模型可以作为人类慢性肾小球肾炎的动物疾病模型，复方保肾颗粒对以上二种模型的尿蛋白、血肌酐、尿素氮含量及肾脏病理改变均有一定的防治作用，其作用可能是通过降低白介素-6、细胞间粘附因子-1、转化生长因子-β1，提高足突裂孔隔膜蛋白Nephrin等四种与肾脏疾病相关的蛋白因子表达来实现的。

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前言

1 慢性肾小球肾炎的流行病学

2 慢性肾炎的病因及治疗现状

3 中医药在慢性肾炎中的研究进展

4 研究思路

第一部分 复方保肾颗粒对家兔阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA）异种血清复合型肾炎的治疗作用及作用机制研究

1 复方保肾颗粒对家兔阳离子化牛血清白蛋白异种血清免疫复合型肾炎的治疗作用

2 复方保肾颗粒对家兔C-BSA免疫复合型肾炎模型肾脏中IL-6和ICAM-1表达的影响

第二部分 复方保肾颗粒对大鼠阿霉素肾炎的治疗作用及作用机制研究

1 复方保肾颗粒对大鼠阿霉素肾炎的治疗作用

2 复方保肾颗粒对大鼠阿霉素肾炎模型肾脏中 TGF-β1 和Nephrin蛋白表达的影响

结论

不足与展望

不足

有待阐明

参考文献

文献综述:慢性肾炎的动物模型及中医药治疗研究进展

致谢

在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

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