补肾活血中药杞菊地黄丸合复方丹参片对青光眼视功能保护的临床及实验研究

摘要

目的：
　　观察补肾活血中药杞菊地黄丸与复方丹参片对眼压（intraocular pressure，IOP）控制稳定后的青光眼患者视功能及视觉通路改善的临床疗效。探索杞菊地黄丸与复方丹参片对慢性高眼压（elevated intraocular pressure，EIOP）模型斯泼累格·多雷（Sprague Dawley，SD）大鼠大脑初级视皮质（primary visual cortex，PVC）B细胞淋巴瘤／白血病-2（B-cell lymphoma／leukemia-2，Bcl-2）、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关x基因（bcl-associated X protein，Bax）基因表达及神经元细胞超微结构的影响，初步了解补肾活血中药对青光眼视功能保护的视中枢作用机制。
　　方法：
　　1.临床研究招募眼压控制后青光眼患者60例，依就诊先后次序随机分为试验组与对照组，试验组给予杞菊地黄丸与复方丹参片口服，对照组给予甲钴胺片口服，连续服药共6个月，比较治疗前后试验组与对照组患者视力、眼压、图形视觉诱发电位（pattern visual evoked potential，P-VEP）P100波潜伏时及振幅、中医症候体征等各项指标。
　　2.实验研究30只SD大鼠，随机分为3组（对照组、给药组、模型组），每组10只。选用烙闭巩膜上静脉方法制作EIOP大鼠动物模型，模型组及对照组每只每天灌胃3ml生理盐水，给药组每只每天灌胃复方丹参片合杞菊地黄丸片混悬液3ml，连续灌胃8周后处死大鼠，观察杞菊地黄丸与复方丹参片对EIOP大鼠眼压、PVC Bcl-2、Bax基因表达及神经元细胞超微结构的影响。
　　结果：
　　1.临床研究
　　治疗前：比较试验组与对照组患者性别、眼别、年龄、病程、矫正视力、P-VEP的P100波潜伏时及振幅、中医症状评分等各项指标，两组间均衡性良好，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。
　　治疗后：（1）视力：两组患者视力变化比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；（2）P-VEP的P100波潜伏时及振幅：试验组P100波潜伏时较治疗前稍缩短，差异无统计学意义（P＞0.05），P100波振幅较治疗前明显提高，差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组P100波潜伏时较治疗前稍延迟，振幅稍下降，差异无统计学意义（P＞0.05）；（3）西医疗效比较：试验组显效率34.62％，总有效率90.38%，对照组显效率21.57%，总有效率66.67%，差异有统计学意义（P＜0.05）；（4）中医症候疗效比较：试验组显效率55.17%，总有效率79.31%，对照组显效率11.24%，总有效率58.62%，差异有统计学意义（P＜0.01）；（5）中医症候各项指标与治疗前相比：试验组各项指标均明显改善，差异有统计学意义（P＜0.05），对照组视物不清、视界缩窄有所改善，差异有统计学意义（P＜0.05），其余症状未见明显改善，无统计学意义（P＞0.05）；治疗后试验组与对照组相比，中医症状体征明显改善，差异有统计学意义（P＜0.01）。
　　2.实验研究
　　造模前：给药组、模型组与对照组SD大鼠眼压差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。
　　造模后：（1）眼压：①造模后即刻，对照组IOP较造模前轻度升高，差异无统计学意义（P＞0.05）；给药组、模型组IOP较造模前明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；给药组、模型组IOP与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.01）。②造模后8周，给药组及模型组IOP与造模前相比，差异有统计学意义（P＜0.01）；给药组与造模后即刻相比，差异有统计学意义（P＜0.01），模型组差异无统计学意义（P＞0.05），对照组与造模前及造模后即刻相比，差异无统计学意义（P＞0.05）（2）初级视皮质Bcl-2、Bax表达：①Bcl-2表达：模型组Bcl-2总面积、积分光密度及平均黑度较对照组及给药组低，差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组Bcl-2、总面积、积分光密度及平均黑度较给药组略低，但差异无统计学意义（P＞0.05）。②Bax表达：模型组Bax总面积、积分光密度及平均黑度较对照组及给药组高，差异有统计学意义（P＜0.05）；给药组Bcl-2、总面积及积分光密度较对照组略高，差异无统计学意义（P＞0.05）。③Bcl-2/Bax影响：对照组及给药组Bcl-2/Bax比率较模型组高，差异有统计学意义；对照组Bcl-2/Bax比率较给药组略高，但差异无统计学意义（P＜0.05）。（3）初级视皮质神经元细胞超微结构：对照组轴突排列均匀、紧密，线粒体及其脊、内质网等形态正常，清晰可见；模型组轴突稀疏，有较多空白区域，内质网扩张明显呈空泡状，线粒体部分肿胀、嵴断裂，出现空泡；给药组轴突轻度水肿，排列较均匀，结构稍疏松，胞浆中细胞器略减少，线粒体轻度肿胀，嵴断裂，部分内质网扩张。
　　结论：
　　补肾活血中药杞菊地黄丸合复方丹参片能改善眼压控制后青光眼患者视力、提升P100波振幅，改善中医症状体征；烙闭SD大鼠巩膜上静脉建立的慢性EIOP动物模型可获得稳定、持久的高眼压。杞菊地黄丸合复方丹参片能降低慢性EIOP模型大鼠眼压，促进初级视皮质Bcl-2表达、下调Bax表达、提高Bcl-2/Bax比率，改善神经元细胞超微结构，从而发挥视功能保护作用。