血脂平稳度对兔动脉粥样硬化病变进展及斑块稳定性影响的实验研究

摘要

研究目的:
　　探讨血脂平稳度对实验性兔动脉粥样硬化(AS)病变的影响,包括血脂平稳度对AS病变进展速度及斑块稳定性的影响,并探讨其可能的发生机制。
　　研究方法:
　　24只健康雄性新西兰大耳兔随机分为三组,分别是:A组6只,予以普通饲料喂养;B组9只,持续予高脂饲料饲养;C组9只,高脂饲料饲养至12周后,进行高、低脂饲料交替喂养,每隔3周交替一次,即13-15周低脂、16-18周高脂、19-21周低脂、21-24周高脂。各组动物饲料120g/(只.天),自由饮水,喂养时间为24周。第0、12、15、18、21、24周末采集耳缘静脉血5ml,以免疫比浊法检测血脂指标、Elisa法检测血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-18(IL-18)、氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、组织因子(TF)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及1型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)的表达;第0、12、24周末行腹主动脉超声检测观察血管内膜变化;24周末处死动物,取血管、心脏等病理标本,主动脉组织行HE染色普通光学显微镜观察病理形态学改变,采用图像软件计算AS斑块面积百分比;同时观察心脏、肝脏、肾脏及脑组织HE切片病理学改变;采用免疫组化法测定主动脉基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和凝集素样氧化修饰低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的蛋白表达。
　　研究结果:
　　1.12周时,A组血脂水平与0周相比无显著变化,B、C两组TC、LDL-C水平较0周显著增加(P<0.01),但两组间各血脂指标水平无显著差异。
　　2.12周时,超声检查可见B、C两组腹主动脉AS斑块形成,两组斑块大小无差异。24周时,B、C两组与12周相同部位的斑块大小相比均显著增大,而C组斑块大小显著大于B组。
　　3.24周时,B、C两组血脂平滑指数(SI)均低于A组,C组SI显著低于B组(P<0.01)。
　　4.24周时,经高、低脂饲料交替饲养12周后,C组成功制造出兔血脂波动模型。
　　5.24周时,C组hs-CRP、IL-18、OX-LDL、ET-1、TF及PAI-1水平较B组显著升高(P<0.05,P<0.01),NO及t-PA水平较B组显著降低(P<0.01)。
　　6.大体标本肉眼观:C组AS斑块病变程度较B组严重,斑块边缘不清、表面不光滑且有破溃现象。C组主动脉内膜斑块面积百分比显著大于B组(P<0.05)。
　　7.HE染色切片镜下观:A组主动脉内膜无AS病变,B、C组均有明显AS斑块,C组管壁内可见大量泡沫细胞及炎症细胞,且斑块内可见新生血管形成。C组斑块厚度显著大于B组但纤维帽厚度却小于B组(分别P<0.05,P<0.01)。
　　8.免疫组化检查示C组MMP-9、LOX-1表达水平显著高于B组(P<0.01)。
　　结论:
　　1.高、低脂饲料交替饲养可显著影响血脂平稳度,可以用于制造兔血脂波动模型;
　　2.血脂平滑指数可准确反映血脂平稳状态;
　　3.血脂水平波动程度与SI成反比,SI越大血脂水平波动越小,SI越小血脂水平波动越大;
　　4.血脂平稳度可显著影响兔AS病变的进展,显著的血脂水平波动可加速动脉斑块的进展速度及斑块增大程度;
　　5.血脂平稳度可显著影响兔AS斑块的稳定性,显著的血脂水平波动可降低动脉粥样斑块的稳定性;
　　6.血脂平稳度对兔AS病变进展及斑块稳定性的影响可能与血脂水平波动时加重血管内皮功能障碍及动脉斑块内炎症反应有关。

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中文摘要

英文摘要

前 言

材料和方法

1. 材料

1.1. 实验动物

1.2. 主要试剂及仪器

2. 方法

2.1. 动物分组

2.2. 兔AS及血脂波动模型的建立

2.3. 血液标本采集及血清指标检测

2.4. 主动脉超声检测

2.5. 血管、心脏等病理标本采集

2.6. 主动脉MMP-9及LOX-1表达的检测

2.7. 主动脉油红“O”染色及图像分析

2.8. 石蜡切片制作，HE染色及形态学观察

2.9. 统计学分析

结 果

1. 实验动物一般情况

2. 血脂指标变化

3. 血脂波动模型的建立

4. 血清hs-CRP、IL-18、OX-LDL、NO、ET-1、TF、t-PA及PAI-1变化

5. 血脂平稳度变化

6. 主动脉超声

7. 主动脉形态学变化

7.1. 大体标本及AS斑块面积百分比

7.2. 主动脉HE染色切片

7.3. 主动脉MMP-9及LOX-1的表达

7.4. 心脏等脏器HE染色切片

讨 论

结 论

参考文献

综述

缩 略 词 表

攻读学位期间发表文章

致 谢