核修饰基因与氨基糖甙类药物在母系遗传性耳聋的发病中的机制及功能研究

摘要

根据大量临床与实验室研究,存在线粒体DNA 12S rRNA基因突变(A1555G或C1494T突变)的成员对氨基糖甙类药物具有超敏性,即正常或微量的氨基糖甙类药物就可能导致这些成员出现明显的听力下降,但来源于不同个体的细胞系对氨基糖甙类药物的敏感性也不同,其可能机制应该是与细胞核背景有关。随后我们在家系资料收集过程中发现了存在线粒体DNA 12S rRNA基因突变(A1555G突变)的家系成员中也发现个别个体表现出对氨基糖甙类药物不敏感,对这一家系进行系统的资料收集和分子机制分析工作。
　　在河北省威县发现一个符合母系遗传规律的氨基糖甙类药物性聋和非综合征性聋家系中,对此家系进行了体格检查、耳鼻咽喉专科检查、听力学检查,并对此家系进行了线粒体DNA全序列测定、氨基糖甙类药物敏感性检测、线粒体DNA相关核修饰基因TRMU和MTO1等研究。
　　该家系母系成员出现不同程度的听力下降。在没有应用氨基糖甙类药物时,随着年龄增加,母系成员的听力下降程度亦随之加重;在应用了氨基糖甙类药物后,除一名母系成员听力还保持正常外,其他成员均出现重度至极重度感音神经性听力下降。通过对全体成员的线粒体DNA序列测序分析,母系成员均有同质性A1555G突变;对该氨基糖甙类药物不敏感成员及家系中另一敏感成员行核基因TRMU和MTO1测序序列分析,对比发现MTO1基因变异:74202000_74202001insG和74202003delG,而TRMU基因未发现有意义的突变。
　　线粒体DNA 12S rRNA基因突变家系中,存在对氨基糖甙类药物不敏感个体,MTO1为可能的核修饰基因,但其分子机制需要进一步深入研究。

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中英文缩略对照表

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前言

材料和方法

一、家系成员：

二、仪器及试剂：

三、体格检查和听力评估

四、外周血基因组DNA的制备

五、线粒体基因组的分析

六、核修饰基因TRMU分析

七、核修饰基因MTO1分析

八、细胞培养

九、线粒体单体型的分析

结 果

一、临床资料

二、线粒体DNA分析

三、核基因突变分析

四、氨基糖甙类抗生素对细胞生长的影响

讨 论

参考文献

总结

文献综述

附录

致谢