臭氧处理对柑橘青霉病菌抑制作用及柑橘保鲜效果的研究

摘要

为了探究臭氧对柑橘青霉病菌(P.italicum)抑制作用及对柑橘采后保鲜效果，采用臭氧处理对柑橘青霉病菌进行臭氧气体熏蒸处理。采用PDA表面萌发法及显微镜观察臭氧对分生孢子萌发率、萌发形态;通过对菌落培养，观察测定臭氧对柑橘青霉病菌菌丝生长量、产孢量、菌落扩展以及菌落形态等生物学性状的影响;通过培养基诱导与摇床培养测定不同臭氧剂量对柑橘青霉相关细胞壁降解酶的活性，进行了臭氧处理对其抑菌活性及相关机理的研究;通过活体实验研究臭氧对柑橘青霉的致病力及其直接处理柑橘后柑橘的自然发病率和其果实贮藏品质的影响。研究结果如下。
　　 1、臭氧处理可显著抑制柑橘青霉病菌分生孢子的萌发率，延迟萌发时间，抑制菌丝生长、产孢及菌落扩展，且剂量越高，效果越明显。浓度为100 mg/m3以上的臭氧气体熏蒸及1.96 mg/L以上的臭氧水处理能够显著表达对柑橘青霉病菌的抑菌活性，而50 mg/m3与对照差异不显著。采用200 mg/m3的臭氧气体熏蒸40 min与7.85 mg/L的臭氧水处理对柑橘青霉的抑菌效果最好，200 mg/m3的臭氧气体熏蒸40 min处理组与对照相比萌发率分别25.34％。臭氧水处理虽无法使得孢子萌发失活，但是能够延迟孢子完全萌发的时间。两种处理方法均抑制柑橘青霉病菌菌丝的生长及产孢能，200 mg/m3的臭氧气体熏蒸40 min与7.85 mg/L的臭氧水处理的菌丝干重与对照相比降低了24.8％、20.8％。平板培养7d后与对照相比产孢量降低了83.9％和22.9％。
　　 2、臭氧气体处理不但能够抑制柑橘发病也能够延缓病斑的扩展。25℃条件下，经浓度200 mg/m3的臭氧气体熏蒸40 min处理组的发病率和病情指数分别为:25％、12，而对照则高达100％、100。另外，臭氧处理能够降低细胞壁降解酶酶活。经浓度200 mg/m3的臭氧气体熏蒸40 min处理，果胶酶、聚甲基半乳糖醛酸酶、羧甲基纤维素酶和β-葡萄糖苷酶组活性分别只有对照组的51％、36％、27.5％、46.9％。
　　 3、臭氧气体熏蒸柑橘果实可以明显延缓柑橘果实青霉病的发病，并能抑制柑橘在贮藏过程中营养品质的下降，25 mg/m3以上的臭氧气体处理即可抑制柑橘果实在贮藏期的青霉病发病情况，25℃条件下，25 mg/m3、50 mg/m3、75 mg/m3处理组的发病率仅为对照组的59.1％、39.4％、34.5％。而4℃条件下，25 mg/m3处理组发病率仅为对照组的25.2％，而50 mg/m3、75 mg/m3未发病。适宜浓度的臭氧气体熏蒸能够抑制柑橘的呼吸作用和表面水分蒸腾，减缓糖、酸，Vc下降的速度，保持柑橘在贮藏期间的品质。而过高浓度的臭氧处理则对柑橘果实造成伤害。50 mg/m3处理组在贮藏28 d后，呼吸速率较对照降低64.9％，失重率比对照组降低了27.4％，Vc、总糖、总酸含量分别比对照组高出15.6％、12.4％、19.4％，在4℃低温下也得到类似结果。采用50 mg/m3臭氧气体进行熏蒸能够有效保持柑橘贮藏期间的品质。

目录

摘要

主要符号表

第一章 绪论

1．1 柑橘及在果树产业发展中的地位

1．1．1 世界柑橘产业发展与保鲜现状

1．1．2 我国柑橘产业发展与保鲜现状

1．2 柑橘采后主要问题与保鲜技术

1．3 柑橘主要采后病害及致病菌

1．4 柑橘青霉菌特点、侵染途径与危害

1．4．1 柑橘采后青绿霉病的发生及危害

1．4．2 柑橘青绿霉病菌的生物学特性

1．4．3 柑橘青绿霉病菌的侵染致病机制

1．5 柑橘青霉病菌防治技术

1．5．1 化学防治技术

1．5．2 生物防治技术

1．5．3 物理防治技术

1．6 本研究内容、意义及创新

第二章 臭氧处理对柑橘青霉病菌的抑菌活性

2．1 材料与方法

2．1．1 试验对象

2．1．2 试剂与仪器

2．1．3 柑橘青霉病菌的分离纯化培养及臭氧处理

2．1．4 臭氧处理对青霉菌生物学特性的影响

2．1．5 数据统计分析

2．2 结果与分析

2．2．1 臭氧处理对柑橘青霉病菌分生孢子萌发的影响

2．2．2 臭氧处理对柑橘青霉病菌分生孢子芽管个数的影响

2．2．3 臭氧处理对柑橘青霉病菌分生孢子萌发形态影响

2．2．4 臭氧处理对柑橘青霉病菌菌落形态的影响

2．2．5 臭氧处理对菌丝生长量的影响

2．2．6 臭氧处理对青霉产孢量的影响

2．2．7 臭氧处理对菌落扩展的影响

2．3 讨论

2．4 结论

第三章：臭氧处理对柑橘青霉病菌致病力及致病相关酶活性的影响

3．1 材料与方法

3．1．1 试验对象

3．1．2 试验材料

3．1．3 试剂与仪器

3．1．4 供试培养基

3．1．5 柑橘青霉的培养与臭氧气体熏蒸处理

3．1．6 臭氧气体熏蒸处理对意大利青霉致病力的影响

3．1．7 臭氧处理对柑橘青霉病菌主要几种细胞壁降解酶活性的影响

3．1．8 数据统计分析

3．2．结果与分析

3．2．1 臭氧处理对意大利青霉致病力的影响

3．2．2 臭氧处理对柑橘青霉果胶酶活性的影响

3．2．3 臭氧处理对柑橘青霉病菌纤维素酶活性的影响

3．3 讨论

3．4 结论

第四章：臭氧处理对柑橘采后青霉病的控制效果及贮藏品质的影响

4．1 材料与方法

4．1．1 供试柑橘

4．1．2 仪器及试剂

4．1．3 臭氧处理

4．1．4 指标测定方法

4．1．5 数据分析

4．2，结果与分析

4．2．1 常温臭氧处理对柑橘采后青霉病的控制效果及贮藏品质的影响

4．2．2 低温臭氧处理对柑橘采后青霉病的控制效果及贮藏品质的影响

4．3 讨论

4．4 结论

第五章 结论与展望

5．1 主要结论

5．2 本文创新点

5．3 展望与建议

致谢

参考文献

攻读学位期间公开发表的论文和承担科研项目及取得成果

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