淀粉样前体蛋白和烟碱型乙酰胆碱受体α7亚型稳定共表达细胞模型的建立

摘要

阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease，AD）是一种以进行性痴呆为主要临床表现的神经退行性疾病，在老年人群中发病率较高。Β淀粉样蛋白的积累被认为是阿尔茨海默病的主要特征和原因。阿尔茨海默病可分为家族遗传型和散发型两类，其中散发型阿尔茨海默病占主要部分，其发病是由于包括遗传、环境在内的多种因素共同作用的结果。已有的研究表明，β淀粉样蛋白是由β-分泌酶和γ-分泌酶对淀粉样前体蛋白进行剪切修饰产生的，基因的突变能影响γ-分泌酶的活性进而影响β淀粉样蛋白的生成，但环境因素和生理信号怎样影响β淀粉样蛋白的生成仍然不是很清楚。流行病学研究表明，吸烟人群中阿尔茨海默病的发病率较低，提出烟碱型乙酰胆碱受体的激动对阿尔茨海默病具有一定改善作用。烟碱型乙酰胆碱受体是存在于细胞膜表面的配体门控型离子通道，在保持细胞内钙稳态和神经递质乙酰胆碱水平方面起重要作用，其中的α7亚型更集中存在于与学习记忆关系密切的基底前脑和海马区。一系列体内体外实验证据表明，烟碱受体与β淀粉样蛋白关系密切，但究竟哪种受体亚型在淀粉样前体蛋白的加工修饰过程中发挥主要作用以及如何发挥作用还不太清楚。 本工作构建了β淀粉样前体蛋白的真核表达载体并以之转染已稳定表达α7 nAChR的SH-EP1，筛选蛋白稳定表达细胞株，从而构建了β淀粉样前体蛋白和α7 nAChR稳定共表达的细胞模型，使独立研究α7 nAChR激动在β淀粉样前体蛋白加工修饰中的作用机理成为可能，也为体外筛选高效能的烟碱受体亚型激动剂奠定了基础。