免疫耐受相关因子在MP感染和支气管哮喘关系中的研究

摘要

背景：
　　近年来，支气管哮喘的患病率在全球居高不下【1,2】，其发病机制既往认为是在易感基因的基础上，T淋巴细胞比例失衡及相关细胞因子表达异常，近期研究认为环境因素尤其是病原体感染在其中的作用不容忽视，如肺炎支原体感染会加重支气管哮喘患儿的哮喘症状，使病情难以控制【3】。另近期有研究表明支气管哮喘患儿的免疫耐受在其发病机制中发挥着重要作用，但肺炎支原体感染与哮喘患儿免疫耐受是否相关，在儿童支气管哮喘发病机制中的具体作用靶点尚不完全明确。
　　第一部分免疫耐受相关因子在肺炎支原体感染和儿童支气管哮喘关系中的研究
　　目的：
　　探讨sPD-1在肺炎支原体感染与儿童支气管哮喘关系中的作用。
　　方法：
　　ELIASA方法检测支气管哮喘感染肺炎支原体组患儿、单纯支气管哮喘组患儿、单纯肺炎支原体感染组患儿以及健康对照组患儿的血浆sPD-1、sCTLA-4的浓度，再与实验室指标（血浆总IgE）进行相关性分析。
　　结果：
　　与健康对照组相比，支气管哮喘感染肺炎支原体组、单纯支气管哮喘组以及单纯肺炎支原体感染组患儿的血浆sPD-1的浓度均升高，气管哮喘感染肺炎支原体组>单纯支气管哮喘组>单纯肺炎支原体感染，组间差异具有统计学意义（P<0.05）；与健康对照组相比，气管哮喘感染肺炎支原体组、单纯支气管哮喘组患儿的血浆总 IgE浓度均升高，组间差异具有统计学意义（P<0.05）。血浆sPD-1的浓度与血浆中总IgE的浓度成正相关。四组血浆sCTLA-4的浓度没有统计学差异。
　　结论：
　　支气管哮喘患儿血浆sPD-1表达水平显著高于健康儿童，感染肺炎支原体的哮喘患儿sPD-1的表达进一步增高，这种高浓度的sPD-1与总IgE成正相关，提示哮喘患儿机体中高表达的sPD-1可能参与了疾病的发生发展，在肺炎支原体感染与哮喘的发病关系中的作用不容忽视。
　　第二部分免疫耐受相关因子（sPD-1、sCTLA-4）和调节性T细胞在MP感染和哮喘关系中的研究
　　目的：
　　通过动物实验进一步探讨免疫耐受相关因子（sPD-1、sCTLA-4）和调节性T细胞在肺炎支原体感染与支气管哮喘发病中的作用。
　　方法：
　　将肺炎支原体菌液感染OVA致敏小鼠模型，采用ELISA方法分别检测小鼠血浆、肺泡灌洗液中 sPD-1、sCTLA-4的浓度；采用流式细胞术检测脾脏组织中调节性T细胞的比例。
　　结果：
　　与正常对照组相比，OVA致敏并感染肺炎支原体组、单纯OVA致敏组、单纯肺炎支原体感染组小鼠血浆sPD-1的浓度均升高，差异有统计学意义（P<0.05），肺泡灌洗液中的sPD-1亦增高，但差异无统计学意义；小鼠血浆中sPD-1浓度与肺泡灌洗液sPD-1浓度成正相关；与正常对照组相比，OVA致敏并感染肺炎支原体组、单纯OVA致敏组小鼠的脾脏调节性T细胞占淋巴细胞的比例下降，而单纯肺炎支原体感染组调节性 T细胞的比例升高，差异具有统计学意义（P<0.05）；四组间sCTLA-4的表达无统计学差异。
　　结论：
　　1．与正常对照组相比，OVA致敏小鼠血浆sPD-1的表达增高，在感染肺炎支原体后，sPD-1的表达进一步增高，提示OVA致敏小鼠体内高表达的sPD-1参与了疾病的发展，sPD-1在肺炎支原体感染和哮喘的发病机制中有一定的作用。
　　2．OVA致敏小鼠调节性T细胞比例降低，参与了哮喘的发病。肺炎支原体感染小鼠调节性T细胞细胞比例增多提示MP可能通过调节性T细胞逃避机体免疫应答，利于MP在体内的存活。

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绪论

第一部分 免疫耐受相关因子在肺炎支原体感染和儿童支气管哮喘关系中的研究

1 引 言

2研究对象

3 研究方法

3.1 相关临床资料收集

3.2各组患儿血清中可溶性sCTLA-4及sPD-1水平的检测

3.3 统计分析

4 结 果

4.1 各组患儿一般情况比较

4.2各组患儿血浆总IgE比较

4.3 各组患儿血浆中可溶性PD-1比较

4.4各组患儿血浆中可溶性PD-1与血浆总IgE的关系

4.5各组患儿血浆中可溶性CTLA-4比较

4 讨 论

第二部分 免疫耐受相关因子（sPD-1、sCTLA-4）和调节性T细胞在MP感染和哮喘关系中的研究

1引言

2材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 统计分析

3结果

3.1小鼠一般情况

3.2小鼠肺组织病理学变化：

3.2 小鼠肺泡灌洗液细胞分析

3.4 小鼠肺组织MP-PCR检测

3.5肺泡灌洗液中sCTLA-4、sPD-1的浓度比较

3.6血浆中sCTLA-4、PD-1的浓度比较

3.7 脾脏中Treg细胞的表达

3.8血浆sPD-1的浓度与肺泡灌洗液中sPD-1浓度成正相关

4讨论

总结

参考文献

致谢