前言
一肺癌早期诊断的重要性
二蛋白质组学研究的技术体系
三肺癌早期诊断标志物研究现状
四本课题研究的意义和目标
第一部分SDS-PAGE与MALDI-TOF-MS联用方法的建立及在无血清培养肺癌细胞差异蛋白质组研究中的应用
1设计思想
2实验材料与方法
2.1实验材料与仪器
2.2组织细胞的培养
2.3培养基的获取
2.4培养基的脱盐处理
2.5 SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
2.6蛋白质酶切
2.7肽混合物的质谱分析
2.8临床样本的免疫组化分析
2.9肺癌病人血清Western-Blotting方法
3实验结果
3.1无血清培养基分泌蛋白SDS-PAGE分离
3.2差异蛋白质的鉴定
3.3 MMP1的临床验证结果
4 讨论
4.1无血清培养体系的选取
4.2培养基的透析
4.3 2-DE分离效果
4.4 SDS-PAGE分离样品的优点
4.5适用于SDS-PAGE分离蛋白质的酶切方法
4.6差异蛋白质的寻找
第二部分SDS-PAGE与nanoLC-ESI-MS-MS联用方法的建立及肺癌蛋白质标志物的筛选
1设计思想
2实验部分
2.1实验材料与仪器
2.2实验方法
3实验结果
3.1对照样品的SDS-PAGE电泳结果
3.2肿瘤样品nanoLC-ESI-MS-MS鉴定信息
4讨论
4.1 MALDI-TOF-MS与nanoLC-ESI-MS-MS两种方法的比较
4.2差异表达分泌蛋白质的生物学意义
4.3成对样品与随机配对样品共同存在的差异
4.4分泌蛋白质的pI与Mw的分布
结语
参考文献
研究生期间撰写与发表的文章
致谢
文献综述 蛋白质组分离技术的最新进展
