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核糖体蛋白S15a对大肠癌细胞增殖影响及与大肠癌发生发展的关系

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绪论

第一部分 RPS15a基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体构建

1.主要实验材料、试剂、仪器和溶液

2.方法

3. 结果

4. 讨论

第二部分 RPS15a基因敲除对人结肠癌细胞RKO增殖的影响

1. 主要实验材料、试剂、仪器和溶液

2. 方法

3. 结果

4. 讨论

第三部分 RPS15a在大肠癌细胞中表达情况

1.主要材料,试剂,仪器

2.方法

3. 结果

4. 讨论

结论

参考文献

附录:相关背景综述翻译:核糖体蛋白:核糖体外功能

致谢

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摘要

背景:
  核糖体蛋白S15a(ribosomal protein S15a,RPS15a)基因在多种癌肿细胞中被检测到表达增高,且在部分癌肿中已被证实为癌基因,然而关于RPS15a在大肠癌中所起仍不明朗。
  方法:
  我们利用RPS15a RNA干扰慢病毒(RPS15a RNAi Lentivirus)感染RKO细胞使其RPS15a基因沉默,从而研究RPS15a抑制对结肠癌细胞增殖行为的影响。同时我们选取上海交通大学医学院附属仁济医院西院2012年切除的部分大肠癌及大肠腺瘤组织,进行免疫组化染色,比较其染色情况以研究RPS15a与大肠癌发展的关系。
  结果:
  相比阴性对照组,RPS15a基因敲除实验组RKO细胞增殖和克隆形成被明显抑制(P<0.01),而实验组RKO凋亡明显上升(P<0.01),另外,实验组RKO细胞在细胞周期S期细胞减少(P<0.01),G2/M期细胞增多(P<0.01)。同时,RPS15a在大肠癌,大肠腺瘤及癌旁组织中表达呈明显阶梯样式(P<0.05),且癌肿分期越晚,RPS15a表达程度越高(P<0.05)。
  结论:
  RPS15a基因敲除的RKO细胞增殖受到明显抑制。RPS15a大肠癌不同发展阶段中表达情况有所不同,且其表达程度与大肠癌分期有关。

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