双歧杆菌显色培养基的研制及配套检测方法的建立

摘要

双歧杆菌在肠道中的有益功能已受到人们的高度关注。越来越多的双歧杆菌被添加到食品和保健品中，因此双歧杆菌定性定量检测对食品或保健品的质量控制和监测显得尤为重要。目前双歧杆菌的检测使用最为广泛的仍是国标方法，这种方法虽然能够准确地计数，但也存在检测周期长、操作复杂、费力耗时等缺点。
　　为建立准确、快捷的双歧杆菌定性定量方法，我们以LBS琼脂为基础，添加能够抑制或促进双歧杆菌生长的物质，同时添加酶显色底物，通过正交实验，经方差分析，确定最佳配方，形成双歧杆菌显色培养基。
　　通过实验，我们发现该双歧杆菌显色培养基，使双歧杆菌能够生长良好，并显蓝色,对保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、沙门氏菌、大肠埃氏菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用，或显白色，从而准确、有效在显色平板上区分开来。利用设计出来的显色培养基建立起检测双歧杆菌的显色培养基平板计数方法，先以双歧杆菌标准菌株和其他食源性标准菌株评价了该检测方法的特异性和灵敏度，然后再以200份市场上购买的自然样品为盲样，评价了该检测方法的实用性，包括检测成本、检测用时以及检测准确性等，所有评价过程均以国标方法为参照。结果：该显色培养基在36℃培养48h就可以直接计数，显色清楚，结果易于观察，检测成本明显低于国标的检测方法；该显色培养基具有较高的特异性，通过对200份自然样品的检测评价，课题所建立的方法与国标方法准确性比较，差异无显著性（F=3.7946，P＞0.05）。结论：课题研制的双歧杆菌显色培养基具有成本低、快速、特异性高、准确性好等优点，满足目前食品行业检测双歧杆菌的需求，为今后生产和研究提供理论依据。

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第一章 文献综述

1.1 益生菌

1.2 双歧杆菌的研究历史与现状

1.3 双歧杆菌的生物学特征

1.4. 双歧杆菌的生物学作用

1.5 双歧杆菌的培养

1.6 双歧杆菌的鉴定

1.7 双歧杆菌的定量分析

1.8 双歧因子的研究进展

1.9 双歧杆菌的应用

1.10 课题研究目的、研究内容和拟解决的关键问题

第二章 双歧杆菌显色培养基的研制

2.1 概述

2.2 材料与方法

2.3 结果与讨论

第三章 双歧杆菌配套检测方法的建立

3.1 概述

3.2 材料与方法

3.3 结果与讨论

第四章 结论与展望

4.1 结论

4.2 展望

参考文献

致谢

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