益心舒对心肌缺血再灌注损伤的影响及作用机制研究

摘要

目的：越来越多的临床证据证明了传统中药在心血管疾病治疗中的显著疗效，并使得中药被广泛接受。本研究探讨一种富含抗氧化活性成分的中药配方----益心舒对心肌缺血再灌注损伤的影响及其潜在分子机制。首先在高胆固醇血症小鼠中观察益心舒对心肌缺血再灌注损伤的影响。其次，探讨益心舒对心肌缺血再灌注损伤诱导的凋亡和氧化应激的影响。最后，进一步研究益心舒改善心肌缺血再灌注损伤的关键作用机制。
　　方法：雄性8周龄C57BL/6小鼠高胆固醇饲料喂养8周后，随机分成假手术(sham)组、对照(vehicle)组、益心舒低剂量(YXS-1)组和益心舒高剂量(YXS-2)组。vehicle组、YXS-1组和YXS-2组通过灌胃途径分别给予生理盐水、益心舒60 mg·kg·1·d1(相当于临床剂量)和益心舒120 mg·kg·1·d1各1周。采用心肌注射LXRα、ERα、PPARα和PPARβsiRNA方法心肌特异性地沉默相应核受体的表达。各组小鼠经过30 min缺血后，于再灌注3 h检测心肌凋亡和氧化应激指标，于再灌注24 h检测心肌梗死面积、存活心肌细胞数量和心功能。采用伊文氏蓝/TTC染色比较心梗面积、micro-PET/CT判断存活心肌、小动物心脏超声评估心功能。并利用TUNEL、Caspase活性测定、透射电镜、Western Blot、免疫组织化学/荧光、ELISA和定量PCR等方法研究益心舒的心肌保护作用机制。
　　结果：在高胆固醇血症小鼠中，益心舒预治疗可以显著减小心肌梗死面积，改善存活心肌代谢水平和心功能。机制研究发现益心舒可通过抑制线粒体介导的凋亡通路而减少心肌细胞凋亡，但是对内质网应激和死亡受体介导的凋亡途径无明显作用。另外益心舒能够通过调节促氧化酶和抗氧化酶的表达水平来减轻氧化应激水平。有趣的是，益心舒预治疗可显著上调代谢性核受体(LXRα、ERα、PPARα和PPARβ)的表达，且采用心肌注射siRNA敲低LXRα表达时，益心舒的心肌保护作用明显减弱。
　　结论：益心舒通过上调LXRα的表达，抑制线粒体介导的心肌细胞凋亡，减轻氧化应激，从而发挥抗心肌缺血再灌注损伤作用。这将为进一步的药理学研究提供参考，为进一步的临床试验提供理论依据。

目录

英文缩略词表

绪论

第一部分 益心舒在高胆固醇血症小鼠中对心肌缺血再灌注损伤的影响

1 引言

2 材料与方法

3 结果

4 讨论

第二部分 益心舒改善高脂血症小鼠心肌缺血再灌注损伤诱导的凋亡和氧化应激

1 引言

2 材料与方法

3 实验结果

4 讨论

第三部分 肝 X 受体 α在益心舒改善心肌缺血再灌注损伤中的关键作用

1 引言

2 材料与方法

3 实验结果

4 讨论

结论

参考文献

致谢

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