外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子在肾移植受者无创性动态免疫监测、预示及临床评价应用研究

摘要

背景：
　　移植肾急性排斥反应多发生在移植术后三个月内。目前临床用于评价及预示移植肾功能的常用指标血清肌酐（SCr）具有一定的诊断延迟性。金标准移植肾穿刺活检鉴于其有创性带来的并发症风险，尚无法用于术后频繁的连续性监测。目前移植临床上亟待发现新的无创生物标记，及早预判移植临床免疫反应和识别干预治疗的效果。本研究通过评估不同无创监测指标在急性排斥反应中免疫监测、识别与评价的价值，并对其免疫预示及预警和急性排斥反应诊断的有效性及其临床意义提出自己的观点，从而为促进肾移植受者及移植肾长期生存提供科学依据。
　　方法：
　　以本肾移植中心自2014年1月至2015年12月，移植术后2个月内发生急性排斥反应的10例肾移植受者和同期肾功能稳定未发生急性排斥反应的34例肾移植受者为研究对象，通过流式细胞技术检测外周血CD4+CD25+、CD4+CD25+CD127low、CD45RO+、CD45RA+、CD3+CD4+、CD3+CD8+等T细胞亚群的绝对计数和相对百分比，采用固相酶标记化学发光免疫分析技术测定移植术后第1、2、4周AR组和肾功能稳定组的血清白介素IL-2R，IL-6,IL-8,IL-10,TNF-α等细胞因子的数值。通过两独立样本t检验、多元线性回归、受试者工作特征曲线，分析外周血T淋巴细胞亚群以及细胞因子定量的变化与移植肾免疫状态的关系。
　　结果：
　　1）急性排斥反应诊断前期：CD4+CD25+CD127low-Treg百分比AR组显著低于Stable组；ROC曲线分析AUC=0.893（P<0.05）。CD4+CD45RA+百分比在 AR组显著低于Stable组；ROC曲线分析AUC=0.867（P<0.05）。CD4+CD45RO+百分比AR组显著低于Stable组；ROC曲线分析AUC=0.953（P<0.05）。CD4+CD25+T细胞百分比比值在AR组低于Stable组；ROC曲线分析AUC=0.732（P=0.11）。
　　2）急性排斥反应诊断期：CD4+CD25+CD127low-Treg外周血中百分比在AR组显著低于Stable组；ROC曲线分析AUC=1.0（P<0.05）。CD4+CD45RA+外周血百分比在AR组显著低于Stable组；ROC曲线分析AUC=0.825（P<0.05）。CD4+CD45RO+外周血百分比在AR组略低于Stable组，但无显著差异；ROC曲线分析AUC=0.66（P>0.05）。CD4+CD45RO+pAR/CD4+CD45RO+AR外周血百分比在AR组显著低于Stable组；ROC曲线分析AUC=0.97（P<0.05）。
　　3）细胞因子分析：移植术后第2，4周，IL-2R在AR组较Stable组显著升高：P<0.05。IL-2R、IL-6在移植术后第2周，线性回归调整R^2值0.851，F检验26.7，p<0.05。IL-2R、IL-6、IL-8在移植术后第4周，线性回归调整R^2值0.95，F检验941，p<0.05。
　　结论：
　　CD4+CD25+CD127low-Treg外周血百分比在急性排斥反应诊断前期具有“重要”的免疫预示及AR“预警”价值。CD4+CD25+CD127low-Treg外周血百分比在急性排斥反应诊断期具有“极重要”的急性排斥反应诊断价值。CD4+CD45RA+外周血百分比在急性排斥反应诊断前期具有“重要”的免疫预示及“预警价值”。CD4+CD45RA+外周血百分比具有“重要”的急性排斥反应诊断价值。CD4+CD45RO+外周血百分比在急性排斥反应中具有“极重要”的免疫预示及“预警”价值。外周血CD4+CD45RO+T淋巴细胞比值（CD4+CD45RO+pAR/CD4+CD45RO+AR）在无创监测中具有“极重要”的急性排斥反应诊断价值。细胞因子IL-2R敏感度较高，显著升高与急性排斥具有高度相关性。联合IL-2R、IL-6两个变量，对AR具有“很高的预测价值”。联合IL-2R、IL-6、IL-8三个变量，对AR有“很高的诊断价值”及AR干预效果判断价值。IL-10值的升高，对于启动联合评估具有重要免疫预示及“预警”作用。

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缩略语表

前言

细胞介导的移植物排斥反应与T细胞的激活

T淋巴细胞亚群及其分类

调节T细胞（Treg）的发现、分型与作用

血清细胞因子

第一部分 研究对象与方法

1.1病例选择：

1.2 研究分组与设计

1.3 T淋巴细胞亚群流式细胞分析

1.4 细胞因子检测分析

1.5 统计方法

第二部分：结果

2.1 人口学特征和一般情况

2.2 T 淋巴细胞亚群指标在临床诊断急性排斥反应前期时变化结果

2.3 T淋巴细胞亚群指标在临床诊断急性排斥反应同期诊断作用的评估

2.4 细胞因子指标在临床诊断急性排斥反应中的变化

第三部分：讨论

3.1 外周血CD4+CD25+CD127low-Treg、CD4+CD25+T细胞监测的临床意义

3.2 外周血CD4+CD45RO+、CD4+CD45RA+T细胞监测的临床意义

3.3 CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞监测的临床意义

3.4 细胞因子监测的临床意义

小结

英文译文

参考文献

附录一：综述:肾移植术后免疫状态分子生物学监测与研究进展

致谢

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