藏药甘青乌头化学成分的研究

摘要

本文以藏药甘青乌头Aconitum tanguticum(Maxim.)Stapf为研究对象，在文献研究的基础上对其进行化学成分和总黄酮提取工艺的研究，目的在于深入了解其主要的药效物质基础，为合理开发利用该药用资源提供参考依据。
　　 甘青乌头为毛莨科乌头属植物Aconitum tanguticum(Maxim.)Stapf的干燥全草，又名唐古特乌头，性凉、味苦，有小毒。主要分布于西藏南部海拔3200米以上的高山草甸或碎石带。甘青乌头为常用藏药榜嘎的药材来源之一，具有清热解毒功效，主要用于治疗传染病发热，肝、胆热病，流行性感冒等。
　　 本文采用活性跟踪指导下的分离方法，研究了甘青乌头中具有抗炎镇痛作用的活性成分。对甘青乌头大量提取，得到甘青乌头粗提物，悬浮于蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯为溶剂萃取分离，分别得到石油醚相萃取物、乙酸乙酯相萃取物和萃余水相，将萃余水相部分上AB-8大孔吸附树脂柱，依次用水，30％乙醇，60％乙醇，95％乙醇溶液洗脱，得到各洗脱部分。然后通过醋酸诱导的小鼠扭体和毛细血管通透性增高实验以及弗氏完全佐剂诱导的大鼠足趾肿胀实验，进行抗炎镇痛活性的研究，发现甘青乌头水洗脱组和60％乙醇洗脱组为抗炎镇痛作用的有效部位。
　　 选用甘青乌头高活性部位进行化学成分的初步分离。采用现代分离手段(硅胶、Sephadex LH-20、ODS和制备HPLC)得到了13个化合物，并通过各种波谱数据(ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HMBC)和理化性质鉴定了11个化合物的结构。这11个化合物分别为山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷(1)，山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷(2)，山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(3)，龙胆苦苷(4)，吐叶醇-9-O-β-D-葡萄糖苷(5)，二氢吐叶醇-9-O-β-D-葡萄糖苷(6)，3，4-二羟基-苯乙醇-β-D-葡萄糖苷(7)，丁香苷(8)，3，5-二甲氧基-顺式-肉桂酸-4-O-β-D-半乳糖苷(9)，芥子酸-4-O-β-D-葡萄糖苷(3，5-二甲氧基反式桂皮酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)(10)，阿魏酸-4-O-β-D-葡萄糖苷(11)。11个化合物均为首次从该植物中分离得到。化合物结构见图1。本研究发现黄酮类化合物也是甘青乌头中的一大类主要成分，并且至今未见任何关于甘青乌头黄酮类成分的文献报道。因此建立了甘青乌头总黄酮含量测定的方法。以芦丁为对照品，运用紫外分光光度法，在波长510nm处测定甘青乌头总黄酮的含量。采用正交试验设计，优选了甘青乌头总黄酮的最佳提取工艺：条件为料液比1:60,70％乙醇超声提取2次，每次2h。本研究可以为甘青乌头化学成分的分离和质量标准控制提供一定的参考。