大鼠小脑颗粒细胞膜褪黑素受体激活对钾通道电流的影响

摘要

褪黑素是哺乳动物和鸟类的一种重要激素.主要由松果体合成,具有广泛的生理作用.这些作用很大部分是通过其特异性受体介导的,中枢神经细胞上虽然已有褪黑素受体的发现,但至今为止,有关褪黑素受体对细胞膜离子通道的作用很少报道.该实验运用膜片钳全细胞电流记录技术研究了褪黑系对原代培养一至六天的大鼠小脑颗粒细胞K<'+>电流的作用.通过应用不同的电压参数和特异性的K<'+>通道阻断剂可在小脑颗粒细胞上分离到至少两种外向K<'+>电流;瞬时外向K<'+>电流（I<,A>）延迟整流外向K<'+>电流(I<,K>）.结果说明在原代培养的新生大鼠小脑颗粒细胞上存在具有功能的褪黑素受体,与K<'+>通道偶联的受体亚型可能为Mellb,该受体激活后可以通过PTX敏感的G蛋白以及非PKC途径来调制外向K<'+>电流,是否涉及到PKA系统对通道的磷酸化的研究正在继续中.由于K<'+>电流与细胞的发育,凋亡有关,该课题为研究褪黑素与细胞发育成熟,凋亡的关系提供了理论依据.

目录

文摘

英文文摘

前言

一、褪黑素的来源、结构、生理作用

二、褪黑素受体的类型、分布

三、褪黑素受体涉及的信号转导途径

四、小脑与小脑颗粒细胞

五、研究意义

材料与方法

一、实验材料与仪器设备

二、药品

三、培养方法

四、膜片钳技术和K+通道电流记录方法

五、 RT-PCR与DNA电泳

实验结果

一、褪黑素可逆性地增加ⅠK

二、褪黑素对ⅠK作用的特性

三、褪黑素对ⅠK失活、激活特性的影响

四、褪黑素通过膜特异受体影响K+电流

五、褪黑素对ⅠK的作用通过G蛋白偶联的途径

讨论

参考文献

致谢

附录