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乙醇干预对新生SD大鼠原代心房肌细胞乙酰胆碱敏感性钾通道组成性激活电流和配体激活电流的影响

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综述 不同PKC亚型的变化对乙酰胆碱敏感性钾通道的影响

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摘要

目的:
  急性乙醇中毒可能导致既往无心脏病史的健康人出现严重的急性心律失常,其中以房颤最为常见。研究表明房颤心房肌细胞中乙酰胆碱敏感性钾通道的组成性激活电流显著增大,此效应与PKCε蛋白表达上调相关。我们的先前研究证实:急性乙醇干预新生SD大鼠原代心房肌细胞24h后乙酰胆碱敏感性钾通道的Kit3.1蛋白表达上调,说明乙醇对该离子通道有确切的影响,但无法得知乙醇干预心房肌细胞后乙酰胆碱敏感性钾通道的电流如何变化。既往以乙醇干预为手段观察H9C2细胞中IGF-1因子变化的研究中报道了100mM乙醇干预后PKCε表达上调,因此我们推测乙醇干预可致乙酰胆碱敏感性钾通道的组成性激活电流增强。本研究意在明确急性乙醇干预对新生SD大鼠原代心房肌细胞乙酰胆碱敏感性钾通道的影响,并探讨该通道在乙醇干预下发生变化的可能机制。
  方法:
  1、新生SD大鼠原代心房肌细胞的培养。
  2、采用Western blot法检测新生SD大鼠原代心房肌细胞PKCε蛋白的表达情况。
  3、应用全细胞膜片钳技术检测Kach通道的基础电流及配体激活电流。
  结果:
  1、Western blot实验结果显示100mM乙醇干预新生SD大鼠原代心房肌细胞24h后PKCε蛋白表达较对照组显著上调。
  2、全细胞膜片钳实验结果显示100mM乙醇干预后新生SD大鼠原代心房肌细胞24h后基础电流增大44%±9%,IKach减小80%±4%。10uM PKC epsilon peptideinhibitor可部分拮抗乙醇干预所致的基础电流增大现象,但对Ikach的变化无明显影响。
  结论:
  100mM乙醇干预新生SD大鼠原代心房肌细胞24h后组成性激活电流增大,此效应与PKCε蛋白表达上调相关。

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