8号染色体上肝癌转移抑制基因的功能性定位及相关研究

摘要

本文主要进行了8号染色体上肝癌转移抑制基因的功能性定位及相关研究，文章共分为三个部分进行讨论。第一部分：肝癌转移抑制基因在8号染色体上的功能定位，本研究运用序列标签位点(STS)为路标，用基因组物理图谱的方法分析人类染色体8p上肝癌转移抑制基因相关染色体缺失状况，为进一步寻找克隆可能的肝癌转移抑制基因奠定基础。经过试验研究，初步推测D8S254-D8S1973所在的人类染色体8p21.1-23.1位置存在可能的肝癌转移抑制基因。第二部分：DLC-1基因在人肝癌组织及不同转移潜能肝癌细胞系中表达的分析，研究旨在应用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)研究位于8p的DLC-1基因mRNA表达与肝细胞癌侵袭转移的关系，结果发现，DLC-1基因在HCC组织中的表达水平与其侵袭性高低相关，在不同侵袭转移潜能的HCC细胞系中的表达水平也与其侵袭性高低呈正相关，二者结果一致，提示该基因表达可能在抑制HCC侵袭转移中发挥重要作用。第三部分：DLC-1基因功能的体外研究，为进一步研究DLC-1基因在肝细胞癌转移复发中的作用，本文构建了pcDNA3.1(-)-DLC-1重组质粒，分别转染MHCC97-H、HCCLM3细胞，观察DLC-1蛋白表达对高转移细胞系生长、侵袭、转移等特性的影响，并对机制进行初步探讨。，MMP9含量依次为34.683、34.468、31.542。提示DLC-1的表达会降低HCCLM3细胞的MMP2、MMP9的分泌，尤其是MMP2的分泌。最后试验得出结论，pcDNA3.1(-)-DLC-1重组质粒转染高转移肝细胞癌细胞系后，可抑制细胞的增殖，促进细胞凋亡比例，细胞运动侵袭潜能明显降低，MMP2分泌量明显减少。细胞周期变化不明显。提示DLC-1与肝细胞癌的侵袭转移密切相关，可能是肝癌的转移抑制相关基因之一。

目录

引言

第一部分肝癌转移抑制基因在8号染色体上的功能定位

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分DLC-1基因在人肝癌组织及不同转移潜能肝癌细胞系中表达的分析

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分DLC-1基因功能的体外研究

前言

材料与方法

实验结果

一重组质粒pcDNA3.1(-)-DLC-1的构建

二重组质粒pcDNA3.1（-）-DLC-1转染HCCLM3细胞效果鉴定

三DLC-1基因转染MHCC97-H、HCCLM3细胞生长、侵袭能力作用的体外研究

四DLC-1基因表达对细胞凋亡的影响

五DLC-1基因表达对细胞周期的影响

六DLC-1基因转染后基质金属蛋白酶的分泌

讨论

参考文献

全文小结与创新性

肿瘤转移抑制基因的研究进展

DLC-1基因的研究进展

附件 在校期间发表及待发表论文

致谢

DLC-1基因表达与肝细胞癌复发转移的关系研究

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