盐酸纳曲酮多囊泡脂质体的研究

摘要

纳曲酮是一种阿片受体纯拮抗剂，用于阻断阿片作用。口服纳曲酮制剂的药效学研究结果表明[1]，纳曲酮及其主要活性代谢产物6β-纳曲醇是阿片拮抗剂，能够竞争性的与阿片受体结合，从而阻断内源性阿片样物质的作用。临床应用于毒品依赖和酒精依赖的治疗，虽然能够改善某些症状[2]，但并不为所有患者接受或者都能获得疗效[3]。同时，口服纳曲酮的疗效往往依赖于患者对药物的顺应性，而重复口服给药后由于血药浓度波动，易在峰值浓度时发生不良反应，进而影响疗效。肌内注射用纳曲酮长效制剂，可使用药次数减少，并可控制血药浓度，因此可以提高治疗顺应性，改善治疗效果[4]。本课题将盐酸纳曲酮包裹于多囊泡脂质体中，利用多囊泡脂质体独有的结构特征，使药物在体内缓慢释放，并延长作用时间，以提高药物疗效。
　　 首先对盐酸纳曲酮多囊泡脂质体进行了处方前研究，考察了盐酸纳曲酮的溶解度，及不同浓度的盐酸纳曲酮水溶液的pH值。结果表明，盐酸纳曲酮在酸性条件有良好的水溶解性，适宜制备为多囊泡脂质体。并且对多囊泡脂质体体内外水相渗透压进行了计算，为处方筛选提供理论依据。
　　 然后进行了盐酸纳曲酮多囊泡脂质体的处方筛选和工艺优化，这是本研究的关键。以增加盐酸纳曲酮的包封率作为处方筛选和优化的重要指标。采用卵磷脂、中性脂质、胆固醇和三油酸甘油酯为载体材料，运用复乳法，制备了盐酸纳曲酮多囊泡脂质体，并对其进行了系统的研究。考察了药/脂比、三油酸甘油酯、葡萄糖、赖氨酸的浓度等处方因素以及初乳的制备方法、离心速度、复乳的振荡时间等制备工艺因素对盐酸多囊泡脂质体包封率的影响，并通过正交实验筛选出最佳处方。结果表明，药/脂比在1:5-1:3范围之间，药/脂比对多囊泡脂质体中盐酸纳曲酮包封率的影响不明显，当药/月旨比低于1:3时，包封率有下降趋势；随着三油酸甘油酯浓度的增加，包封率先增加后下降，三油酸甘油酯的量为3.4μmol时，盐酸纳曲酮多囊泡脂质体的包封率较高；当葡萄糖的浓度逐渐上升到4％时，其包封率成上升趋势，而当继续加大葡萄糖的浓度时，其包封率有呈现下降的趋势；离心速度过低或过高，盐酸纳曲酮的包封率都有所下降，离心速度在近600×g/min时，盐酸纳曲酮的包封率较高；制备初乳的方法的强度越大，形成的C型复乳就越多，包封率相对较高；当赖氨酸的浓度高于20mM，低于40mM浓度时，盐酸纳曲酮多囊泡脂质体的包封率相对较高；振荡时间越长脂质体的粒径就越小，多囊泡脂质体的包封率也会显著下降。
　　 当卵磷脂与胆固醇、三油酸甘油酯的摩尔比为4.5:4.5:2，三油酸甘油酯摩尔量为3.4μmol，葡萄糖的浓度为4％，第二水相中L-赖氨酸的浓度为40mM，初乳的体积和第二水相的体积比为1:2.5，形成复乳时的涡旋震荡时间是10s，离心速度和时间分别是600×g和10 min时，制备的盐酸纳曲酮多囊泡脂质体的包封率为44.5％。建立了高效液相色谱法对盐酸纳曲酮的含量及包封率进行了系统的研究。所建方法准确性好、灵敏度高，辅料不干扰主药测定。
　　 用电子光学显微镜观察了盐酸纳曲酮多囊泡脂质体的表面形态，其外观较圆整，每个多囊泡脂质体均由很多非同心的囊室构成，粒径范围5-50μm之间。并分别以生理盐水和血浆为释药介质对盐酸纳曲酮多囊泡脂质体进行了体外释放试验。以血浆为释放介质，盐酸纳曲酮多囊泡脂质体的释放药物50％的时间为24hr，维持释放时间达到72hr。
　　 最后进行了盐酸纳曲酮多囊泡脂质体初步体内研究。选用6只体重均为250g左右的雄性SD大鼠，分别注射盐酸多囊泡脂质体和盐酸纳曲酮溶液，进行了体内药物释放的比较。盐酸纳曲酮溶液肌内注射后，迅速达到峰浓度，并且很快消除，12hr后血浆中已不能检测到药物。而肌内注射盐酸纳曲酮多囊泡脂质体后，达峰时间较溶液推迟，峰浓度明显降低，药物在SD大鼠体内的消除时间显著延长，体内释放至少可达5天。说明盐酸纳曲酮多囊泡脂质体有较好的缓释效果。
　　 本研究制备的盐酸纳曲酮多囊泡脂质体处方设计合理、包封率较高，缓释效果较好。