正常乳腺脂肪组织干细胞对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB231迁移能力促进作用的实验研究

摘要

研究背景：
　　骨髓来源间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells，BM-MSCs)可以趋化至乳腺癌周边参与肿瘤微环境的组成，并促进肿瘤细胞增殖、迁移及转移的能力。癌症相关成纤维细胞（cancer associated fibroblast，CAF）亦可增强肿瘤的迁移及转移能力，有研究证实其部分来源于骨髓间充质干细胞，脂肪干细胞(adipose derived stem cells，ADSCs)作为外周组织干细胞在这方面的作用仍不清楚。脂肪组织作为乳腺的主要间质成分，含有丰富的脂肪干细胞，但是其对乳腺癌直接的作用目前仍不明确。此外由于ADSCs容易在皮下的白色脂肪组织中获取以及日益受到重视的再生潜能，自体脂肪皮瓣转移及自体脂肪干细胞移植广泛应用于肿瘤术后器官重建及组织修复。然而，关于ADSCs在肿瘤患者中应用的安全性仍无强有力的证据。
　　研究目的：
　　1、分离培养正常人乳腺组织中脂肪来源干细胞。
　　2、研究单纯脂肪来源干细胞对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞MDA-MB231迁移能力的影响。
　　3、研究经三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231肿瘤条件培养基(tumorconditioned medium，TCM)处理过的脂肪来源干细胞对MDA-MB231迁移能力的影响。
　　材料和方法：
　　取缩乳术患者切除的乳腺脂肪组织分离培养ADSCs，P6为实验细胞，利用transwell研究其对MDA-MB231细胞迁移能力的影响。分为三组:
　　1、MDA-MB231单独在上层小室培养。
　　2、单纯ADSCs与MDA-MB231在上层小室共培养。
　　3、经MDA-MB231 TCM处理的ADSCs与MDA-MB231在上层小室共培养。
　　12小时后固定膜下层细胞并计数统计，运用SPSS16.0做单因素方差分析、t检验，P＜0.05有统计学意义。
　　实验结果：
　　1、流式细胞仪检测发现人乳腺组织ADSCs不表达造血细胞的特异性表面标志CD34，强表达CD29、CD44、CD90。
　　2、各组100倍倒置荧光显微镜下每个视野的肿瘤细胞平均数，Group1:265.05，Group2:313.80，Group3:380.45，组内单因素方差分析P＜0.001，组间两两t检验，均为P＜0.001。
　　实验结论：
　　1、单纯ADSCs与MDA-MB231共培养能促进肿瘤细胞的迁移能力。
　　2、经MDA-MB231 TCM处理的ADSCs与MDA-MB231共培养亦能促进肿瘤细胞的迁移能力。
　　3、相比单纯ADSCs，经MDA-MB231 TCM处理的ADSCs具有更强的促进肿瘤细胞迁移的能力。
　　4、本研究的结果为三阴性乳腺癌的治疗方法提供了思路。

目录

中英文缩写一览表

摘要

前言

材料与方法

一、实验材料

二、实验方法

实验结果

1、人脂肪干细胞的分离及培养

2、人脂肪干细胞表型的检测

3、ADSCs对乳腺癌细胞体外迁移能力的影响

讨论

参考文献

全文小结

综述：间充质干细胞在肿瘤微环境中对肿瘤的作用

致谢

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