人参类化妆品中人参二醇和人参三醇的柱前衍生RP-HPLC法研究

摘要

人参是一种传统的名贵中药,由于其特殊的功效在保健美容化妆品中的应用越来越广。人参的主要功效成分为人参皂苷,其中达玛烷型皂苷含量最高,这类皂苷水解可得到人参二醇和人参三醇皂苷,常以此含量来评价人参及其制品的质量。人参有效成分作为人参类保健美容化妆品的主要功能添加剂,其含量的多少直接影响到人参类化妆品的质量。本文主要介绍了高效液相色谱法(HPLC)的基本原理和应用现状,综述了人参有效成分人参皂苷的分析现状及HPLC在人参皂苷分析中的应用,阐述了人参有效成分的定性定量分析方法。研究了人参皂苷酸解得到人参二醇和人参三醇的工艺参数,其最佳工艺条件为:70％的乙醇溶液作溶剂,7%的盐酸作为酸化剂,酸解反应温度为80℃,酸解回流时间为3 h。研究了人参二醇和苯甲酰氯的衍生反应条件,其最佳衍生反应条件为:3倍量的苯甲酰氯,2倍量的吡啶,80℃的衍生温度,2 h的衍生时间。建立了柱前衍生反相HPLC分析法,测定了人参类化妆品中人参二醇和人参三醇皂苷的含量。采用天美LC2130高效液相色谱仪,固定相为C18(4.60×150mm,5μm),流动相为乙腈:水=40:60(V/V),以流动相为溶剂,紫外光度检测器,检测波长为230nm,柱温为25℃,流速为1.0mL·min-1,采用峰面积外标法定量。在浓度0.01~0.10mg·mL-1之间,人参二醇和人参三醇衍生物的色谱峰面积与其浓度呈现良好的线性关系。人参二醇的线性回归方程为:y=3087735x+324849,相关系数为R=0.9996,相对标准偏差为1.61%(n=6,c=0.06mg·mL-1),加标回收率在98.2%~103.6%之间,检出限为0.07μg·mL-1。人参三醇的线性回归方程为:y=45362537x+383509,相关系数为R=0.9977,相对标准偏差为2.84%(n=6,c=0.06mg·mL-1),加标回收率在96.5%~101.7%之间,检出限为0.06μg·mL-1。利用此方法将人参提取液和人参类化妆品经过提取,水解和衍生化等操作处理后,测得人参提取液中人参二醇皂苷含量为52μg·mL-1,人参三醇皂苷含量为39μg·mL-1。人参类化妆品中人参二醇皂苷含量为22μg·g-1,人参三醇皂苷含量为17μg·g-1。人参二醇衍生物色谱峰保留时间在11min左右,人参三醇衍生物色谱峰保留时间在16min左右,该方法分离度和灵敏度较高,是一种比较理想的的分析检测方法,对化妆品中人参有效提取物的质量控制具有重要意义。

目录

摘要

ABSTRACT

1 绪论

1.1 引言

1.2 人参概述

1.2.1 人参有效成分研究概况

1.2.2 人参有效成分的提取方法

1.2.3 人参有效成分的分离方法

1.2.4 人参有效成分含量的测定方法

1.3 高效液相色谱法

1.3.1 高效液相色谱法的发展

1.3.2 高效液相色谱分离原理

1.3.3 高效液相色谱法的分类

1.3.4 高效液相色谱流动相

1.4 高效液相色谱定性定量分析方法

1.4.1 高效液相色谱定性分析

1.4.2 高效液相色谱定量分析

1.5 高效液相色谱法在人参皂苷分析中的应用现状及展望

1.6 本课题的研究思路和内容

1.7 本课题的研究目的和意义

2 人参皂苷酸解条件的研究

2.1 引言

2.2 实验部分

2.2.1 实验原料及试剂

2.2.2 实验仪器

2.2.3 实验方法

2.3 结果与讨论

2.3.1 乙醇浓度对人参皂苷酸解效果的影响

2.3.2 盐酸用量对人参皂苷酸解效果的影响

2.3.3 酸解温度对人参皂苷酸解效果的影响

2.3.4 酸解回流时间对人参皂苷酸解效果的影响

2.3.5 最佳酸解条件实验的重现性

2.4 本章结论

3 人参二醇、人参三醇的柱前衍生条件的研究

3.1 引言

3.2 实验部分

3.2.1 实验原料及试剂

3.2.2 实验仪器

3.2.3 实验方法

3.3 结果与讨论

3.3.1 苯甲酰氯用量对衍生效果的影响

3.3.2 无水吡啶用量对衍生效果的影响

3.3.3 衍生反应温度对衍生效果的影响

3.3.4 衍生反应时间对衍生效果的影响

3.3.5 最佳衍生条件的重现性

3.3.6 人参二醇衍生物色谱图及分析

3.4 本章结论

4 人参二醇、人参三醇柱前衍生反相高效液相色谱法的建立

4.1 引言

4.2 实验部分

4.2.1 实验原料及试剂

4.2.2 实验仪器

4.2.3 实验方法

4.3 结果与讨论

4.3.1 流动相的组成及比例的选择

4.3.2 流速的选择

4.3.3 柱温的选择

4.3.4 检测波长的选择

4.3.5 最佳色谱条件

4.3.6 色谱图

4.3.7 人参二醇、人参三醇柱前衍生反相高效液相色谱法的建立

4.3.8 样品分析

4.4 本章结论

5 结论

参考文献

攻读硕士学位期间的研究成果

致谢