人IL-12和B7-1联合基因治疗黑色素瘤的实验研究

摘要

该研究利用中国上海地区人骨髓有核细胞混合培养后,诱导人IL-2(hIL-2)的p40和p35亚基和B7-1的mRNA的转录,以逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)克隆上述三条基因的cDNA,分别进行序列测定,表明所克隆序列同以报道的序列不尽相同,提示上述基因可能存在多态性,有中国人特征.该研究在动物实验中应用低毒的转基因制剂主要考虑到腺病毒载体的免疫原性高,真正应用于临床较困难;该研究选用人黑色素瘤模型主要考虑较多文献报道细胞因子对其治疗效果好,在该研究基础上进行了大肠癌和胃癌的类似研究工作正在进行,以期为此治疗方法最终临床应用提供充实的基础.

目录

英文缩写

前言

第一部分中国人IL-12和B7-1的cDNA克隆、测序分析

一、白细胞介素12的p35和p40双亚基的cDNA克隆

材料和方法

结果

二、共刺激分子B7-1的cDNA克隆

材料和方法

结果

讨论

第二部分带有hIL-12cDNA和B7-1cDNA真核表达载体构建与重组腺病毒栽体的构建、包装和扩增

一、真核表达栽体的构建

材料和方法

结果

二、腺病毒载体的构建、包装和扩增

材料和方法

结果

讨论

第三部分hIL-12和B7-1cDNA的体外转录及杀瘤活性测定

材料和方法

结果

讨论

第四部分hIL-12和B7-1转基因制剂治疗移植于Scid小鼠的人体黑色素瘤A375的疗效评价

材料和方法

结果

讨论

小结

附件

参考文献

致谢

综述一

综述二