孕期缺锌仔鼠脑中差异表达基因的筛选及哺乳期后不同膳食锌水平对小鼠ZnT3、DMT1和MT-1 mRNA表达的影响

摘要

第一部分.目的:探讨母鼠在孕期和哺乳期缺锌对仔鼠成年后脑功能特别是学习记忆能力的影响,考察孕期缺锌母鼠所产仔鼠脑内基因的差异表达状况并筛选相关差异表达基因.结论:孕期及哺乳期轻度缺锌即可造成仔鼠成年后学习记忆能力下降,同时也影响海马的突触可塑性,孕期是锌缺乏造成脑功能损伤的关键时期;基因芯片技术所筛选的差异表达基因显示,孕期缺锌引发的仔鼠脑功能损伤可能与神经细胞Ras-MAPK信息传递途径中MAPKK2表达紊乱有关.第二部分.目的:观察哺乳期后幼鼠在不同膳食锌水平条件下的生长情况,探索膳食锌水平对幼鼠锌相关基因ZnT3、DMT1及MT-1 mRNA表达所产生的影响.结论:成功建立哺乳期后幼鼠不同膳食锌水平模型,实验结果提示哺乳期后保证膳食足量锌对幼鼠的生长发育十分重要;膳食锌水平对哺浮期后小鼠睾丸及皮层ZnT3、DMT1、MT-1 mRNA表达存在不同程度的影响.膳食缺锌可致睾丸及皮层中ZnT3 mRNA表达显著降低,睾丸DMT1 mRNA在高锌时表达量下降.膳食锌引发的基因表达变化可能是哺乳期后幼鼠维持锌内稳态的一种反馈保护机制.

目录

文摘

英文文摘

英文缩写

前言

第一部分应用基因芯片技术筛选孕期缺锌仔鼠脑中差异表达基因

1材料与方法

1.1试验动物

1.2行为训练及海马电生理记录

1.3基因芯片筛选仔鼠脑中差异表达基因

2结果

2.1锌缺乏对实验仔鼠学习记忆的影响

2.2锌缺乏对实验仔鼠海马脑片LTP的影响

2.3基因芯片筛选仔鼠脑中差异表达基因

3讨论

4小结

第二部分哺乳期后不同膳食锌水平对小鼠ZnT3、DMT1和MT-1mRNA表达的影响

1材料与方法

1.1实验动物

1.2主要试剂及仪器

1.3小鼠血清锌含量测定

1.4小鼠RNA提取及引物合成

1.5RT-PCR法克隆ZnT3cDNA片断

1.6RT-PCR法检测小鼠组织中ZnT3 mRNA的分布

1.7半定量RT-PCR法检测不同水平膳食锌小鼠睾丸、皮层、海马等组织中ZnT3、DMT1及MT-1 mRNA的表达

1.8数据处理

2结果

2.1不同膳食锌水平对小鼠生长发育的影响

2.2血清锌测定结果

2.3获得ZnT3、DMT1以及MT-1cDNA片断

2.4小鼠ZnT3mRNA的组织分布

2.5哺乳期后不同膳食锌水平小鼠大脑皮层、海马、睾丸等组织ZnT3、DMT1以及MT-1 mRNA表达量的比较

3讨论

3.1哺乳期后缺锌对幼鼠生长发育的影响

3.2肾脏MT-1mRNA表达与机体锌水平的关系

3.3不同膳食锌水平对睾丸ZnT3、DMT1及MT-1 mRNA表达的影响

3.4不同膳食锌水平对脑中ZnT3、DMT1及MT-1mRNA表达的影响

3.5关于高锌对喂组的设立

4小结

总结

致谢

参考文献

附录硕士期间发表文章

附录1锌转运体研究进展

附录2二价金属离子转运体DMT1研究进展

附录3小鼠ZnT3cDNA片断的克隆及其mRNA表达