猪带绦虫囊虫病DNA疫苗的中试及免疫效力研究

摘要

猪带绦虫囊虫病是重要的人畜共患病之一,在拉美、非洲及亚洲多国有广泛的分布.在中国西北、西南地区,该病的流行不仅对人体健康带来危害而且产生巨大的经济损失.虽然近年该病的流行呈现一定的下降趋势,但远未被控制.有效疫苗的研制和应用是预防该病流行的重要手段之一,这对保护人民身体健康,减少经济损失具有重要意义.本课题在已有的猪带绦虫囊尾蚴DNA疫苗pcDNA3-cC1的基础上,对该疫苗的中试工艺、效力试验和安全性的若干关键问题进行了较为系统的研究.具体包括:(1)制备工艺和质检标准的确立:采用流加补料和变温法为基础的50L发酵罐发酵方法;在传统的碱法抽提质粒的基础上建立了疫苗质粒中试规模的质粒制备工艺;制定了相应的质量检测标准.(2)疫苗有效性的中间试验:以囊虫卵攻击疫苗接种后的仔猪,结果显示接种DNA疫苗后仔猪的减虫率达到80﹪以上.DNA疫苗的免疫期试验结果显示免疫4个月后进行攻击的3批疫苗与免疫后3周攻击的对应批次的疫苗产生的保护率接近,表明接种该DNA疫苗的仔猪对抗囊虫卵攻击的保护力能维持4个月以上,且这种保护力无明显变化.另外,就联合免疫策略对保护水平的影响进行了分析:一方面采用DNA疫苗初免,相应抗原的蛋白质疫苗加强免疫的疫苗接种策略,同时以仅接种蛋白质疫苗的接种组作为对照观察组.疫苗接种6周后两种免疫方式的减虫率无明显差异,而疫苗接种20周后联合免疫组的减虫率相对较高,表明该法能获得相对较长的保护期.抗体亚型检测和淋巴细胞增殖实验的结果提示,这种保护期的差异可能与两种接种方法产生的免疫应答类型的不同有关.(3)对DNA疫苗特有的安全性问题进行了分析:DNA疫苗接种后的组织分布情况;机体是否会产生免疫耐受及其它免疫病理变化.结果显示,在本课题的检测项目及检测精度范围内未检测到以上不安全问题的发生.同时,疫苗的一般毒性及安全性试验也显示正常结果.

目录

英文缩写词表

摘要

前言

第一章DNA疫苗的制备、检测工艺研究

一、工程菌的发酵

二、质粒的大量制备

三、疫苗质粒的质量检测

四、讨论

参考文献

第二章猪囊尾蚴DNA疫苗的效力分析

一、DNA疫苗诱导免疫应答

二、DNA疫苗诱导有效保护率的最低有效量

三、DNA疫苗的免疫期及保存期试验

四、田间试验的免疫效力

五、DNA疫苗和蛋白疫苗的联合免疫

六、讨论

参考文献

第三章DNA疫苗的安全性分析

一、疫苗质粒的体内分布及降解

二、DNA疫苗对免疫系统的影响

三、一般安全性试验

四、讨论

参考文献

综述--疫苗研制策略进展

前言

1.活疫苗

2.亚单位/灭活疫苗

3.DNA（核酸）疫苗

4.抗原制剂

结语

参考文献

在读期间发表论文情况

致谢