应用小干扰RNA抑制人瘢痕疙瘩Smad基因表达的实验研究

摘要

目的：探讨应用小干扰RNA(smallinterferencingRNA，siRNA)特异性抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad(Smad2、Smad3)基因表达，明确siRNA转染对细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达的影响。方法：根据siRNA设计原则，针对人Smad基因序列特征分别设计Smad2、Smad3特异siRNA，转染瘢痕疙瘩成纤维细胞；RT-PCR及WesternBlot检测靶基因表达。结果：合成并筛选出特异抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad基因siRNA，通过特异抑制Smad基因表达可有效抑制细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达。结论：首次合成并筛选出特异抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad2、Smad3特异siRNA。通过抑制Smad2或Smad3基因表达，阻断TGF-β信号转导可以有效降低瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原基因表达。

目录

文摘

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缩略词

前 言

第一部分瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad2特异siRNA制备和活性鉴定

第二部分Smad2 siRNA对瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原基因表达的影响

第三部分siRNA对瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad3基因表达的抑制

小结

致谢

·综述·

·在读期间发表论文·

附录常用试剂配置及仪器设备