调控细胞外信号调节激酶-1对肝星状细胞功能的影响

摘要

目的：探讨调控细胞外信号调节激酶-1(ERK-1)对肝星状细胞(HSC)功能的影响。 方法：应用RT-PCR、Western blot方法筛选ERK-1小干扰RNA(siRNA)。用免疫细胞荧光化学法、MTT法、RT-PCR、ELISA法、流式细胞术等检测沉默ERK-1基因对HSC活化增殖、Ⅰ、Ⅲ型胶原、TIMP-1 mRNA表达以及ECM合成等生物学功能的影响。并观察瘦素对HSC的作用，以及ERK-1基因沉默对瘦素的调控作用。采用RT-PCR和免疫组化法检测大鼠肝纤维化组织瘦素及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达。 结果：189 siRNA对ERK-1有较好的基因沉默效果。与对照组相比，基因沉默后HSC增殖减慢，G0/G1细胞数增高，而S期细胞数减低。Ⅰ、Ⅲ型胶原及TIMP-1 mRNA表达减弱，胶原分泌减少。肝纤维化组织中瘦素与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达呈正相关。ERK-1基因沉默可阻断瘦素对HSC的刺激作用。 结论：RNA干扰技术调控ERK-1可抑制HSC生物学功能；瘦素能促进肝纤维化的形成，其作用可能通过ERK-1信号转导通路；ERK-1可能成为治疗肝纤维化新的靶点。

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摘要

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前言

第一部分细胞外信号调节激酶-1基因沉默对肝星状细胞生物学活性的影响

前言

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第二部分细胞外信号调节激酶通路与瘦素的关系

前言

材料和方法

结果

讨论

参考文献

结论

文献综述1 siRNA在肝病中的应用

文献综述2 瘦素在肝纤维中的作用

致谢

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