增殖诱导配体在系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎患者中的表达及其受体融合蛋白功能性研究

摘要

目的：研究系统性红斑狼疮(SEE)、类风湿性关节炎(RA)患者外周血增殖诱导配体(APRIL)的表达及临床意义，APRIL和B细胞激活因子(BAFF)表达的相关性。穿膜蛋白活化物(TACI)-BAFF受体(BR3)受体融合蛋白对APRIL/BAFF生物学功能的阻断作用。 方法：采用荧光定量PCR技术和ELISA方法检测外周血单个核细胞(PBMCs)和血清中APRIL/BAFFmRNA和蛋白的表达，同时测定患者组血清免疫球蛋白0gG、lgA、IgM)浓度和抗双链DNA(ds-DNA)抗体滴度。构建TACI-BR3-pcDNA3.1重组真核表达载体，瞬时转染COS-7细胞获得受体融合蛋白，经细胞实验检测融合蛋白与APRIL、BAFF结合和阻断作用。 结果：SLE、RA患者APRILmRNA表达显著高于正常对照组，治疗后未缓解组APRIL表达显著高于其他组。APRIL与BAFFmRNA表达呈现中等程度有意义相关性，APRIL蛋白表达与BAFF未见显著相关性。在体外细胞功能实验中，受体融合蛋白能初步与APRIL/BAFF结合，发挥阻断其部分生物学功能的作用。 结论：APRIL蛋白和mRNA在SLE、RA中高表达，可作为疾病辅助诊断和预后检测指标；受体融合蛋白能通过竞争结合配体APRIL//BAFF，而阻断其部分生物学功能，为其治疗性作用奠定了基础。

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论文说明：英文缩写中英文对照表

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摘要

前言

第一部分SLE、RA患者外周血增殖诱导配体的测定

第二部分TACI-BR3-pCDNA3.1(+)真核表达载体的构建

第三部分TACI-BR3双受体融合蛋白的表达及细胞功能实验

实验一受体融合蛋白TACI-BR3-Fc的瞬时表达及鉴定

实验二受体融合蛋白TACI-BR3-Fc阻断相应配体功能实验

小结

APRIL和BAFF与自身免疫病等疾病关系

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