叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸和K-ras基因相互作用与胰腺癌关系的研究

摘要

胰腺癌作为恶性程度最高的肿瘤之一，近年来研究发现发病率呈明显上升趋势。
　　 由于缺乏早期诊断方法和有效治疗手段，其确诊后的平均生存时间不超过6个月。阐明其病因并进行一级预防在胰腺癌控制中具有重要的实际意义。多数研究表明，叶酸、维生素B12等营养成分慢性缺乏可能是胰腺癌的危险因素。在其它恶性肿瘤病因研究中发现，叶酸、维生素B12等营养成分缺乏与恶性肿瘤发病关系可能依赖于K-ras基因突变情况。K-ras基因突变是胰腺癌病程中的早期分子事件。因此可以推测，叶酸、维生素B12缺乏可能通过K-ras突变或者通过与其它病因所致的K-ras基因突变的协同作用导致胰腺癌发生。此外，叶酸、维生素B12等营养成分缺乏可导致高同型半胱氨酸血症。同型半胱氨酸氧化过程中产生的自由基可导致DNA氧化合损伤，从而引起K-ras基因突变。在其他肿瘤病因研究中，高同型半胱氨酸血症被认为是可能的危险因素。所以可以推测，高同型半胱氨酸血症可能是胰腺癌的危险因素，其致癌机制可能类似于叶酸缺乏。本课题采用以医院人群、社区健康人群为基础的病例-病例-对照研究，探讨叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸和K-ras基因相互作用与胰腺癌发生的关系。
　　 一、研究目的：
　　 通过分别进行针对血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与胰腺癌，血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因野生型胰腺癌，血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因突变型胰腺癌关系的研究，及血浆叶酸、维生素B12与血浆同型半胱氨酸水平关系的研究，探讨叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸和胰腺K-ras基因突变相互作用与胰腺癌发病关系，从而为胰腺癌预防控制策略和措施的制定提供科学依据。
　　 二、材料与方法
　　 采用基于医院及社区健康人群的1∶1病例-对照研究设计，以胰腺导管腺癌手术治疗患者为病例组研究对象，以健康体检人群为对照组研究对象，由专门训练的调查员对所有研究对象采用面访和病案调查的方法采集问卷信息。问卷包括两部分，第一部分包括病例纳入标准、排除标准；第二部分包括一般情况、既往史、家族史及个人史、饮食史、月经史。
　　 血浆叶酸、维生素B12浓度应用电化学发光法检测，血浆同型半胱胺酸应用循环酶法检测。巢式聚合酶链式反应DNA 片段扩增技术（巢式PCR）及直接测序法确定胰腺癌肿瘤细胞K-ras基因突变情况。
　　 在血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与胰腺癌关系的研究中，采用配对资料分析方法。单因素分析应运单因素条件Logistic 回归分析模型，P值小于0.25的因素与本研究目标因素（血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸）入选多因素分析；多因素分析应运多因素条件Logistic 回归分析模型。
　　 在血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因野生型或K-ras基因突变型胰腺癌关系的研究，及血浆叶酸、维生素B12与血浆同型半胱氨酸水平关系的研究中，采用成组资料分析方法。连续变量、分类变量分别选用t 检验、χ2 检验进行单因素分析，P值小于0.25的因素与本研究目标因素（血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸）入选多因素分析；多因素分析运用多因素非条件Logistic 回归分析模型。
　　 并分别计算回归方程中各因素的OR值（Odds Ratio）及其95％可信区间（CI）。
　　 三、结果
　　 1.本课题研究共纳入经病理诊断为胰腺导管腺癌患者、健康对照人群各66例，病例组、对照组按1∶1，年龄（±3岁）、性别匹配。
　　 2.66名胰腺癌患者中，胰腺癌组织细胞K-ras 野生型39例，突变型共27例。
　　 3.血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与胰腺癌关系在不考虑胰腺癌K-ras基因是否突变的情况下，单因素分析结果表明：血浆叶酸浓度、血浆维生素B12浓度、血浆同型半胱氨酸浓度、水果摄入、白肉摄入、蛋类摄入、牛奶摄入是胰腺癌潜在的影响因素（P≤0.25）。
　　 将这些潜在因素纳入多因素分析，结果显示：血浆叶酸[OR=1.004，95％CI（0.041,2.434），0.993]、维生素B12[OR=2.290，95％CI（0.904,5.800），0.080]与胰腺癌无明显关系；血浆同型半胱氨酸升高是胰腺癌的保护因素，血浆同型半胱氨酸降低是胰腺癌的危险因素[OR=0.291，95％CI（0.109,0.779），0.014]。
　　 4.血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因野生型胰腺癌关系单因素分析结果显示：血浆叶酸浓度、血浆维生素B12浓度、血浆同型半胱氨酸浓度、水果摄入、白肉摄入、蛋类摄入、牛奶摄入是胰腺癌潜在的影响因素（P≤0.25）。
　　 将这些潜在因素纳入多因素分析，结果显示：血浆叶酸[OR=0.504，95％CI（0.193,1.317），0.162]、维生素B12 [OR=0.630，95％CI（0.231,1.715），0.365]、同型半胱氨酸[OR=2.603，95％CI（0.988,6.855），0.053]与K-ras基因野生型胰腺癌无明显关系。
　　 5. 血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因突变型胰腺癌关系单因素分析结果显示：血浆叶酸浓度、血浆维生素B12、血浆同型半胱氨酸浓度、水果摄入、牛奶摄入、咖啡摄入是胰腺癌潜在的影响因素（P≤0.25）。
　　 将这些潜在因素纳入多因素分析，结果显示：血浆叶酸与K-ras基因突变型胰腺癌无明显关系[OR=1.069，95％CI（0.972,1.176），0.169]；血浆维生素B12 升高是K-ras基因突变型胰腺癌的保护因素[OR=0、995，95％CI（0.992,0.998），0.002]；血浆同型半胱氨酸升高是K-ras基因突变型胰腺癌的危险因素[OR=3.689， 95％CI（1.146,11.878），0.029]。
　　 6. 血浆叶酸、维生素B12与血浆同型半胱氨酸的关系：
　　 单因素分析结果显示：血浆叶酸浓度、血浆维生素B12浓度、咖啡摄入是同型半胱氨酸潜在的影响因素（P≤0.25）。
　　 将这些潜在因素纳入多因素分析，结果显示：血浆叶酸与血浆同型半胱氨酸无明显关系[OR=0.778，95％CI（0.384,1.574），0.485]；血浆维生素B12与血浆同型半胱氨酸呈负相关，前者的升高伴随后者的升高的可能性减小[OR=0.438， 95％CI（0.216,0.886），0.022]。
　　 四、结论：
　　 本研究结果显示：在不考虑胰腺癌K-ras基因是否突变的情况下，血浆叶酸、维生素B12与胰腺癌无明显关系，血浆同型半胱氨酸是胰腺癌的保护因素；在血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因野生型胰腺癌关系的研究中，血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与其无明显关系；在血浆叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸与K-ras基因突变型胰腺癌关系的研究中，血浆叶酸与其无明显关系，血浆维生素B12 升高是K-ras基因突变型胰腺癌的保护因素，血浆同型半胱氨酸升高是其危险因素；在血浆叶酸、维生素B12与血浆同型半胱氨酸关系的研究中，血浆叶酸与血浆同型半胱氨酸无明显关系，血浆维生素B12与血浆同型半胱氨酸呈负相关，前者的升高伴随后者的升高的可能性减小。
　　 上述结果证实了维生素B12缺乏可能通过K-ras突变或者通过与其它病因所致（如：血浆同型半胱氨酸升高）的K-ras基因突变的协同作用导致胰腺癌发生；同型半胱氨酸升高导致胰腺癌的机制可能类似于维生素B12缺乏。进一步阐明维生素B12、同型半胱氨酸等饮食相关因素在胰腺癌发病中的作用，可望为胰腺癌预防控制策略和措施的制定提供科学依据。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

前 言

第一部分 材料与方法

第二部分 结 果

第三部分 讨 论

全文小结

主要参考文献

附录1 胰腺癌及健康人群调查表

附录2 综述 叶酸与胰腺癌关系研究进展

在读期间发表论文

致 谢