拮抗放线菌的分离筛选及鉴定

摘要

为了寻找和发现有高效拮抗作用的生防放线菌，为植物病害生物防治和进一步开发放线菌生物制剂提供有效菌源。本试验采用诱捕分离法和稀释分离法，从陕西商洛，周至及山东诸城等地采集的7个土样中获得54株放线菌，通过肌内拮抗试验筛选出4株代表菌株05-5，05-11，05-25和06-6。 试验进一步探讨了这4株代表菌株的发酵液及滤液的抗菌谱；在温室试验中对4株放线菌的防病促生效果进行了研究，以期得到优秀的生防放线菌。发酵液活性测定试验表明，菌株06-6的发酵液抑菌活性较强。在温室活体试验中，检测4株放线菌对番茄狄霉病的防治效果及对番茄幼苗的促生作用，结果表明菌株06-6对番茄狄霉病的最佳防治效果达到81.2％。 对筛选出的优秀放线菌06-6进行复配试验，分类鉴定及发酵条件优化。将菌株06-6与本试验室提供的4株放线菌进行合理组合，在温室中检测5株生防放线菌混合使用对黄瓜白粉病的防治效果及对黄瓜幼苗生长的促进作用，并最终确定了最佳复配组合方案：06-6+153十Am3；通过菌株06-6发酵参数优化，筛选出该菌的最适发酵培养基DBY，确定其最佳发酵瓶装量为50mL/250mL，最佳发酵时间为144h，最佳发酵PH为7.5；放线菌的形态特征鉴定和分子生物学鉴定方法相结合，将菌株06-6初步归类为灰红紫类群(Griseorubroviolaceus)。

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第一章文献综述

1.1放线菌的分离及筛选

1.1.1放线菌的分布

1.1.2放线菌的分离

1.1.3放线菌的筛选

1.2放线菌的分类概况

1.2.1经典分类

1.2.2化学分类

1.2.3分子生物学鉴定

1.3影响放线菌发酵的几个参数

1.3.1培养基成分

1.3.2溶氧量

1.3.3发酵温度

1.3.4初始pH值

1.4放线菌在植病生防中的应用及存在问题

1.4.1农用抗生素的利用

1.4.2活菌制剂的利用

1.4.3酶及代谢物的利用

1.4.4放线菌应用中存在的问题

1.4.5放线菌生防制剂的应用前景

1.5论文设计思路

第二章材料与方法

2.1实验材料

2.1.1供试土样

2.1.2供试靶标菌

2.1.3试验所用培养基

2.1.4实验试剂与仪器

2.2试验方法

2.2.1放线菌的分离及初筛

2.2.2 4株放线菌的温室防病促生试验

2.2.3菌株06-6防病促生作用研究

2.2.4菌株06-6发酵条件优化

2.2.5菌株06-6鉴定

第三章结果分析

3.1放线菌的分离和初筛

3.1.1放线菌的获得

3.1.2 皿内拮抗测定

3.1.3放线菌发酵液的抑菌作用

3.2 4株放线菌的温室防病促生作用

3.2.1对番茄灰霉病的防治效果

3.2.2对番茄幼苗生长的促进作用

3.3菌株06-6对黄瓜植株生长的影响

3.3.1对黄瓜种子萌发的影响

3.3.2对黄瓜幼苗生长的影响

3.3.3与其它4株生防放线菌的复配试验

3.4菌株06-6发酵条件的优化

3.4.1发酵培养基的筛选

3.4.2几个参数对发酵液抑菌作用的影响

3.5菌株06-6的鉴定

3.5.1培养特征及生理生化测定

3.5.2分子测定结果

第四章结论与讨论

4.1结论

4.2讨论

4.2.1放线菌的分离筛选

4.2.2几株放线菌的复配

4.2.3菌株06-6的发酵参数研究

4.2.4菌株06-6的鉴定

参考文献

附件

致谢

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