地塞米松对TNF-α和TRAIL双向诱导猪肾成纤维细胞增殖与凋亡作用的影响

摘要

较低浓度的TNF-α和TRAIL可以促使FRSs从G0/G1期向S期和G2/M期推进，细胞增殖指数(Prl．=s+G2/M)增加，促进细胞DNA合成，细胞增殖旺盛；较高浓度的TNF-α和TRAIL，可抑制FRSs增殖和由G0/G1期进入S期，细胞增殖指数下降，细胞增殖抑制甚至凋亡。地塞米松(DEX)可以协同TNF-α和TRAIL对FRSs进行双向诱导调控。地塞米松与低浓度因子(TNF-α和TRAIL)协同作用可促进FRSs增殖，地塞米松的干预使得细胞的G0/G1期进一步下降，PRL.进一步增加。提示地塞米松可使更多细胞通过G1/S期限制点对细胞周期进行调节，从而促进细胞增殖。地塞米松协同高浓度因子作用于FRSs可促使细胞周期阻滞于G0/G1期，抑制FRSs的生长，从而促使其发生凋亡。地塞米松和TNF-α可调控OPG和RANKL基因的表达，并呈剂量依赖型。TNF-α可上调OPG的表达，而地塞米松可抑制OPG的表达，上调RANKL的表达。二者共同作用时，一定浓度的地塞米松可以抵消TNF-α对OPG表达的上调作用。

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论文说明：缩略词表

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第一章 肾间质成纤维细胞和纤维化疾病

1.1肾间质成纤维细胞的生物学特性

1.2成纤维细胞的增殖或凋亡与纤维化疾病的关系

1.3影响成纤维细胞增殖或凋亡的外源性细胞因子

1.3.1TNF-a及其受体

1.3.2TRAIL及其受体

1.3.3TNF样受体OPG

1.3.4OPG的结合蛋白－RANKL

1.3.5TNF-a和TRAIL对成纤维细胞增殖与凋亡的调控

1.4糖皮质激素地塞米松对细胞生存能力的影响

1.4.1地塞米松的抗炎效应

1.4.2对细胞生存能力的影响特点

1.5小结与展望

第二章 细胞凋亡和凋亡的检测分析

2.1细胞凋亡的特征、诱因及凋亡执行途径

2.1.1细胞凋亡的形态学和生化特征

2.1.2细胞凋亡的诱因

2.1.3.凋亡执行途径

2.2细胞凋亡的检测分析

2.2.1细胞凋亡的形态学观察

2.2.2细胞凋亡的流式细胞仪分析

第三章 猪肾脏成纤维细胞分裂培养及其生物学性能检测

3.1材料与方法

3.1.1材料

3.1.2试验方法

3.1.3统计与分析

3.2结果

3.2.1形态学观察

3.2.2免疫细胞化学染色体测结果

3.2.3冻存细胞复苏后细胞形态和生长状态观察

3.2.4微生物学检测结果

3.3讨论

第四章 TNF－A诱导猪肾成纤维细胞增殖与凋亡的作用特点及地塞米松对其作用的影响

4.1材料与方法

4.1.1材料

4.1.2方法

4.1.3统计分析

4.2结果

4.2.1 TNF-α影响猪肾成纤维细胞增殖与凋亡的形态学分析

4.2.2TNF-α低浓度促进猪肾成纤维细胞增殖而高浓度可诱导猪肾成纤维细胞凋亡

4.2.3地塞米松对细胞因子诱导细胞增殖和凋亡的作用

4.2.4细胞周期和凋亡率分析

4.2.5 TNF-α和地塞米松对猪肾脏成纤维细胞OPG/RANKL基因的转录表达影响

4.3讨论

4.3.1较低浓度TNF-α(0.01～1mg/L)具有明显的促FRSs增殖作用，地塞米松可增强该作用

4.3.2较高浓度TNF-α10～100mg/L)可诱导FRSs凋亡，地塞米松可增强该作用

第五章TRAIL诱导猪肾成纤维细胞增殖与凋亡的作用及地塞米松对其作用地影响

5.1材料与方法

5.1.1主要材料

5.1.2主要方法

5.1.3统计方法

5.2结果

5.2.1细胞形态观察和成纤维细胞鉴定

5.2.3地塞米松影响TRAIL诱导的FRSs细胞活率变化

5.2.4细胞周期和凋亡率分析

6.2.5相关基因半定量RT-PCR分析。

5.3讨论

5.3.1较低浓度TRAIL(0.01～5mg/L)具有明显的促FRSs增殖作用，地塞米松可增强该作用

5.3.2较高浓度TRAIL(10～50mg/L)对FRSs作用不明显，地塞米松干预可促使较高浓度TRAIL诱导FRSs凋亡

参考文献

致 谢

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