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超大型烟草变异株的抢救性克隆繁育及生物学鉴定

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独创性声明

致谢

Ⅰ文献综述

1植物突变体研究进展

1.1植物细胞突变体的筛选与应用

1.2植物细胞突变体筛选的原理与方法

1.3突变体的鉴定

2烟草生物技术研究进展

2.1概述

2.2烟草的器官培养

2.3烟草的花药培养

2.4烟草的原生质体培养和体细胞杂交

2.5烟草的转基因研究

3本研究的目的意义

Ⅱ材料与方法

1克隆繁育体系的建立及组织培养条件的优化

1.1植物材料

1.2腋芽的直接扦插繁殖

1.3愈伤组织诱导

1.4芽的分化和伸长

1.5根的分化

1.6炼苗和移栽

2变异株的鉴定

2.1变异株的形态观察

2.2细胞学观察

2.3生理生化特性分析

2.4变异株烟草的分子生物学鉴定

Ⅲ结果与分析

1超大型烟草变异株的克隆繁育及植株再生条件的优化

1.1腋芽的扦插繁殖

1.2愈伤组织的诱导和芽的分化

1.3不同激素组合对根诱导的影响

1.4炼苗及移栽

2再生植株的生长和形态比较

2.1营养生长期的生长和形态

2.2生殖生长期生长和形态差异

3细胞学观察

3.1染色体数目

3.2叶片气孔保卫细胞叶绿体数量统计

4生理生化特性比较

4.1叶绿素含量的测定

4.2叶片蛋白质含量测定

4.3同工酶电泳图谱比较

4.4可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳图谱比较

5分子生物学鉴定

5.1 RAPD分析

5.2 mRNA差异显示

Ⅳ讨论

1直接扦插和组织培养在挽救烟草超大型变异株中的应用

2超大型变异株的无性后代的生物学特性

2.1形态变异

2.2细胞学观察

2.3变异株无性系的生理生化特征

2.4变异株无性系的分子生物学分析

2.5超大型烟草晚花突变体的可能性

Ⅴ结论

Ⅵ参考文献

Ⅶ图版及说明

攻读博士期间发表文章

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摘要

2001年10月中旬在陕西省旬阳县发现一株超大型K346烤烟变异株.该变异株与同时栽培的对照株比较,有较大的生长优势,其株高3.4米,径围17.5公分,叶数129片,平均每1.3天萌发一片新叶.同时该变异株还具有优良的品质,全株无病虫害,烟叶烤后呈柠檬黄色,组织疏松,光泽鲜亮,油分充足,质量上乘.由于天气变冷,该变异株未开花成熟已被铲除,没有留下后代.但仍有少数成活腋芽存留.为了拯救和保存这一品质资源,该研究对变异株腋芽进行了抢救性组织培养和繁育.为了证明该变异株是否为突变体,我们对其无性后代进行了形态学比较,细胞学观察,生理生化特征和分子分析.

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